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月月大可

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3, MolEPI+1): 有经验的高手啊! 2011-12-13 18:54:43
引用回帖:
1楼: Originally posted by torontogirl at 2011-11-15 15:31:39:
我最近在做AMPK的蛋白纯化,用的是原核表达,诱导表达的大部分目的蛋白都是包涵体,小部分是可溶的。我就利用这小部分的可溶蛋白过了两次His亲和层析柱,纯化出来的纯度大概在85%以上,可惜在浓缩的时候出现大量沉 ...

把你的小分子底物加进去,或者加一些蛋白的底物。这种东西对蛋白的结构稳定非常之重要。
两年前我接手的一个蛋白,原核表达量非常大,但是一旦从镍柱上洗脱后,4度过夜就沉淀。后来加入该蛋白的底物,冰箱里最久放过两个星期都没问题。

尝试一下吧。
20楼2011-12-13 16:40:39
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