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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 基因组文库-----genomic library

比较低级的问题,求助!
一个实验室有了土壤样品的metagenomic library,那么:
1,这个library是怎么保存起来的?以菌落形式还是液体形式还是其他?
2,从土壤提出来的DNA fragment 都已经ligated with vector 并transformed into host bacteria了是么?
3,如果我从这个library 中screen a certain gene of interest,该怎么做?前提是只知道这个基因的function,其DNA sequence and other genetic information is unknown.
如果library 是以菌落形式保存的话,我能否将这些含有各种DNA fragment 的single colony 挑取(并可以扩大培养),接种到 functional screening medium 上进行筛选?
可能思路有些混乱。请各位朋友指点。谢谢
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向钱看,向厚赚
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pcl-bunny

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-15 14:03:44
楼主您好,看到您的帖子是关于土壤DNA基因组文库,我们实验室就是做这一块的,所以想就此谈谈我的看法:
1>保存方式:一般菌液保存于96孔板,或保藏管。
2>因为基因组过大不易保存,一般用DNA片段经酶连、导入感受态细胞保存。
3>对于有价值的基因,已知其功能,可基于其功能进行筛选:挑取单克隆子,接于相关筛选平板。

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NOPAIN,NOGAIN!
8楼2011-11-15 13:40:25
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

板凳也自己占了吧
向钱看,向厚赚
3楼2011-11-15 11:57:56
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

还是没人,算了。地板砖也抢了
向钱看,向厚赚
4楼2011-11-15 11:58:24
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懒蛋

铁杆木虫 (著名写手)

土行孙了晕~~~
向钱看,向厚赚
5楼2011-11-15 11:59:00
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