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关于Q-PCR的一些疑问
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最近在做Q-pcr，要扩增一个表达量很底的mRNA 设计了引物上机去做，溶解曲线不单一有两个峰，一个大一点一个小一点，大一点的应该是产物，但两峰高度差距不算太大，距离倒是蛮远的 扩增曲线测定的Ct值在32左右，由于样品的原因，提取的RNA可能不是很纯，RNA浓度也不好提高了 改变过退火温度，变化不大 换过很多引物，由于这个mRNA丰度太低，很多的引物都扩不出来 仪器自动分析的CT值在复孔之间差距0.5以内 想问一下，我这个数据可以用么，如果不行要怎样提高扩增的特异性或者怎样改变一下？ |
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terry130
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