24小时热门版块排行榜    

查看: 5214  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

shenxing325

铜虫 (小有名气)

[求助] 急!蛋白截短表达不成功~

情况是这样的:我本来要表达一个蛋白,但是由于比较大,不容易表达(也是没做出来),因此我就选N末端(疏水性)进行表达。因为这一段前面还有信号肽,因此把这一段截出来的话我就人为在前面加上ATG以及在后面加上TGA。现在经过测序已经正确的连接到表达载体上了,但是还是没有表达(用SDS-PAGE作为检测手段),各位有做过蛋白截短表达嘛?请帮忙找一下原因,谢谢!!也做了比较久了,各位帮帮忙~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenxing325

铜虫 (小有名气)

wanhscn: 及时给3楼发部分悬赏 2011-11-15 17:28:24
引用回帖:
3楼: Originally posted by kokia at 2011-11-13 22:09:13:
基因来源和宿主表达系统可能不匹配。有时候也是没办法,我一个师弟做过这个,分了三段,两段表达,一段不表达。我们实验室表达系统较少,所以没有继续做,你可以试一下别的表达系统,或者载体,宿主换几种试一下。

用的是pET系统,有没有什么好的推荐?
5楼2011-11-14 09:01:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

sl35537417

木虫 (正式写手)

没有表达还是形成包涵体?
2楼2011-11-13 20:31:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kokia

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-11-14 16:41:06
基因来源和宿主表达系统可能不匹配。有时候也是没办法,我一个师弟做过这个,分了三段,两段表达,一段不表达。我们实验室表达系统较少,所以没有继续做,你可以试一下别的表达系统,或者载体,宿主换几种试一下。
3楼2011-11-13 22:09:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenxing325

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sl35537417 at 2011-11-13 20:31:54:
没有表达还是形成包涵体?

就直接将菌体煮裂上样的,所以应该是没有表达
4楼2011-11-14 09:00:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见