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小鼠肝脏基因组DNA提取大部分降解为300-500bp了
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出现降解很严重，大部分都在300-500bp左右。也就蛋白酶Ｋ多加了点，还有别的原因吗？ |
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4楼2011-11-12 08:56:12
2楼2011-11-11 21:32:42
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+6, BioEPI+1): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:20:42
athenawj(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+6, BioEPI+1): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:20:42
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基因组DNA？跑电泳不是应该用Lambda/HIII DNA Marker（有23k条带）好一些吗？ 1、东西要干净，高温灭菌处理，操作不宜过于剧烈。如需要非常完整的基因组，则枪头最好做钝化处理更好。 2、肝脏应该很容易裂解，裂解时间不宜过久，把组织块匀浆一下，加蛋白酶K 50-55度水浴消化上30-60min或直至无可见组织块即可。 3、肝脏同时会有很多RNA，有些电泳看起来“降解”可能是未完全消化彻底的RNA造成的，如希望得到无RNA污染的DNA，可适当增加RNase用量及消化时间。 |
6楼2011-11-12 09:53:28
7楼2011-11-13 15:16:09
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athenawj3楼
2011-11-11 21:58
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