24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 770  |  回复: 4

shuifen1108

金虫 (正式写手)

[求助] PCR失败

目标片段是900,模板是1200bp左右,做PCR跑出来的胶条带在500bp 和 750bp之间有一条,另外除了模板条带之外,还有一个很亮的2000多的条带,目标条带一点木有,悲剧啊,求可能原因。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

shuifen1108(金币+2): 2011-11-14 22:21:02
模板条带?
1200bp的模板,能看见模板条带, 模板太浓了
有非特异结合以及模板之间的交错结合
我感觉要降低模板浓度,再稀释50倍!
真相是最大的奢侈品
2楼2011-11-11 21:27:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuifen1108

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-11-11 21:27:30:
模板条带?
1200bp的模板,能看见模板条带, 模板太浓了
有非特异结合以及模板之间的交错结合
我感觉要降低模板浓度,再稀释50倍!

试一下看看,反正这次做已经把退火温度比理论的高4度左右了,不知道还能不能把退火温度提高,最浓的两个条带是500-750之间和2000多的,模板条带还好,很纳闷,怎么会出现这两个条带呢
3楼2011-11-12 09:15:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 有参考价值! 2011-11-12 09:50:59
shuifen1108(金币+2): 2011-11-14 22:21:27
引用回帖:
3楼: Originally posted by shuifen1108 at 2011-11-12 09:15:52:
试一下看看,反正这次做已经把退火温度比理论的高4度左右了,不知道还能不能把退火温度提高,最浓的两个条带是500-750之间和2000多的,模板条带还好,很纳闷,怎么会出现这两个条带呢

我觉得只要引物特异性强,退火温度可以继续提高,曾经见一学长用80℃退火,大胆尝试吧!
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
4楼2011-11-12 09:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuifen1108

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by imyting at 2011-11-12 09:25:44:
我觉得只要引物特异性强,退火温度可以继续提高,曾经见一学长用80℃退火,大胆尝试吧!

太牛了吧  退火温度这么高  那我再尝试一下把退火温度再提高点吧  3Q
5楼2011-11-12 10:24:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shuifen1108 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] RY:中国产出的科学垃圾论文,绝对数量和比例都世界第一 +4 zju2000 2026-04-14 6/300 2026-04-14 11:00 by bjdxyxy
[考研] 机械还有还有名额吗?太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +26 土豆er? 2026-04-09 29/1450 2026-04-13 15:15 by 独醉梦孤城
[考研] 药学求调剂 +3 RussHu 2026-04-12 4/200 2026-04-12 17:49 by 陈皮皮
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 305求调剂 +6 77Qi 2026-04-07 6/300 2026-04-12 02:30 by 秋豆菜芽
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 一志愿厦大0856,306求调剂 +15 Bblinging 2026-04-11 15/750 2026-04-11 22:53 by 314126402
[考研] 中药学调剂 初试324 +4 洋甘菊、 2026-04-10 6/300 2026-04-11 09:41 by gong120082
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +4 长烟旖旎 2026-04-08 5/250 2026-04-10 10:31 by 颖果儿
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 一志愿中科院105500专业总分315求调剂 +6 lallalh 2026-04-09 7/350 2026-04-09 17:51 by lallalh
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +5 拾柒12。 2026-04-08 5/250 2026-04-09 16:43 by 允当适度
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-08 12/600 2026-04-09 14:27 by rl1980
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 生物学学硕,初试351分,求调剂 +4 …~、王…~ 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:49 by limeifeng
信息提示
请填处理意见