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学学习唱唱歌

新虫 (初入文坛)


[交流] 急问,关于透析

我用1.5摩尔氯化钠提糖蛋白,(微波辅助),离心,之后4摄氏度透析的时候,透析袋里出现大量絮状沉淀,这到底是怎么回事啊?急问,求高人指点,多谢!
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学学习唱唱歌

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
9楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2011-11-05 14:15:46:
比如说你的蛋白溶液(透析袋内的)盐离子浓度是1.5M,那第一次透析时你的透析液盐离子浓度1.2或1.0M,透析3-5个小时(你得确定长时间在水溶液里你的蛋白不会怎么失活),第二次换透析液就降到0.8-0.5M,第三次换 ...

你好,我昨天做了梯度透析,效果一直很好,可是当我从0.4mol/L降至0.1mol/L的时候,透析袋内又出现了絮状沉淀,我都要疯了,我以为这个浓度差不大呢,已经快成功了却死在那了我都要自杀了!!!后来我没办法,死马当活马医,在透析液中加了一些氯化钠,使其浓度高于透析袋内浓度,想试试能不能反透析一下,结果效果不错,袋内的絮状沉淀消失了,可是我心里依然没底,这么来回折腾,我怕我要的东西都已经变性死翘翘了,万一这样一步错步步错,后面的分离工作就都变成无用功了。请帮我分析一下,我的这种补救措施有意义吗?袋内沉淀复溶会有问题吗?急切等待你的高见,谢谢了!
13楼2011-11-07 10:02:55
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)



学学习唱唱歌(金币+1):谢谢参与
学学习唱唱歌(金币+1): 2011-11-05 13:59:40
学学习唱唱歌(金币+5): 2011-11-05 14:00:06
你这么高的NaCL,透析要分步透析的,就是一次降低盐离子浓度,若你将这么高盐离子浓度的蛋白直接放入盐离子很低的透析液中,由于盐离子浓度急剧变化很容易产生沉淀的。
3楼2011-11-05 13:53:05
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)


打错字了,是依次逐渐降低透析液盐离子浓度
5楼2011-11-05 13:53:48
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学学习唱唱歌

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2011-11-05 13:53:05:
你这么高的NaCL,透析要分步透析的,就是一次降低盐离子浓度,若你将这么高盐离子浓度的蛋白直接放入盐离子很低的透析液中,由于盐离子浓度急剧变化很容易产生沉淀的。

谢谢!能不能说的具体点,怎么逐步、依次降低盐离子浓度,什么步骤?多谢你了!
7楼2011-11-05 14:02:32
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