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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

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[交流] 菌种活化与保存的方法

希望大家多多指教，谢谢。

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1楼2011-11-04 09:38:06

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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

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引用回帖:

9楼: Originally posted by JUANXIA at 2011-11-06 21:37:09:
我们都是和微生物打交道的

是啊是啊

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11楼2011-11-06 22:45:13

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newtime007

木虫 (正式写手)

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魏小勇2011(金币+1): 谢谢 2011-11-05 11:44:05
zhang8826857(金币+3): good 2011-11-06 20:50:18

菌种活化与保存的方法
1.菌种活化：
一.配置菌种适宜生长的培养基
二.将菌种从保藏状态恢复到室温状态，比如将冷冻的菌种解冻
三.将保藏的菌种接种到培养基中培养
四.挑选形状良好的菌落，接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，通过一些理化指标得到优良的菌落。
2.菌种保存：常用的菌种保存方法包括：普通冰箱保存法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、液氮超低温保藏法。
1 普通琼脂斜面冰箱保存法：将培养成熟的斜面或平板置于4℃冰箱中，一般可保存一个月，每月传代一次。
2 液体石蜡法：将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内，培养成熟，再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm，置4℃冰箱保存。保存时间可达3～6个月。
3  沙土管法保存：将沙或土过筛﹑烘干﹑装管﹑灭菌﹑然後将菌种制成孢子悬液滴入其中混匀﹐放到盛氯化钙的干燥器里吸除水分﹐干燥後保存或用火焰封管保存。可保存较长时期。
4  真空冷冻干燥法：将细胞悬液每0.1～0.2毫升注入一无菌安瓿瓶﹐于-40℃预冻1小时﹐再于-20～30℃﹑真空度为13.3帕的条件下脱水，用火焰溶封﹐置10℃保存，可长期保存。
5  液氮保存法：用甘油或二甲亚(DMSO)作保护剂制备细胞悬液﹐分装入无菌安瓿瓶﹐每管0.2毫升﹐在控制温度下降速率为1℃/分钟的条件下预冻至-40℃﹐然後立即放入液氮生物贮存罐中气相(-150℃)保存。微生物的大多数属种适于慢速冻结和快速解冻。
　　