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junxiao0320

金虫 (小有名气)

学生

[求助] 质粒怎么会提不出来'?

用试剂盒小提质粒时,从来没遇到过的现象:加完buffer2混匀,有些不清楚,以为正常,加完3混匀,不是明显的白色沉淀,而是整体的蛋白胶状物,离心12000rpm,10分钟,没离下东西,只是有透明丝状物
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

我前段时间出现了这种情况,3次,后面发现是杂菌。是因为LB里的抗生素失效了才长起来的。。。同样的试剂盒,换正确的菌就没有那种胶状的东西了。
7楼2011-11-05 23:46:10
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查看全部 13 个回答

王玉民

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

junxiao0320(金币+1): 2011-11-04 08:21:29
junxiao0320(金币+1): 2011-11-04 08:21:48
junxiao0320(金币+1): 2011-11-05 18:48:01
试剂盒用久了吧,那个buffer2是氢氧化钠和SDS,开口时间长了与空气中的二氧化碳反应了,也可能是3有问题了。换换试剂盒试试。要不就是菌不对。
心晴
2楼2011-11-03 21:33:53
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子

细菌本身的问题吧
开开心心做科研,踏踏实实做好人。
3楼2011-11-03 22:07:21
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longrna

新虫 (正式写手)

加完Buffer 2不澄清可能有以下原因,
1.buffer 2失效,但一般plasmid kit 保持期有1年,除非你kit太久,否则此可能性不大。
2.菌的问题。可能你养的菌有杂菌也会出现buffer 2不澄清的情况。
(另外,你buffer 1 2 3加时没搞错吧?

你可以同时做一个确定没问题的菌(即我们常说的对照)来排除是kit还是你菌的问题。
伟大航线....
4楼2011-11-04 09:28:04
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