应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 发酵液能直接上HPLC吗
291/1返回列表
查看: 4410  |  回复: 28
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

794378428

银虫 (小有名气)

[交流] 发酵液能直接上HPLC吗

请教一下，要测发酵液中的某一产物，可以直接上液相吗，还是要怎么处理一下。大家是怎么做的呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-11-02 10:32:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
794378428(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+3): 高手，谢谢回复哦~~~ 2011-11-02 12:11:29
zhang8826857(金币+2): 补两个金币，鼓励下新虫，呵呵 2011-11-02 15:19:13
不能，一般液相的管路都非常细，很容易堵的。不知楼主的产物在哪里？菌内还是菌外，包涵体还是可溶表达，处理方法虽然不同，但是大致就是提取有效成分，避免颗粒物。一般可通过离心除去……仅供参考
赞一下(3人) 回复此楼
2楼2011-11-02 10:47:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1029732992

木虫 (著名写手)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
处理以后可以上的~
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-02 11:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

icebergwu

木虫之王 (文学泰斗)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
当然不能了，我们都是先高速离心，再用膜过滤，才能用高效液相测样的！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-11-02 12:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jireh

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
794378428(金币+1):谢谢参与
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-02 15:18:47
一般不可以。
胞外产物先离心取上清，如果你要测的物质含量较低，那么要先浓缩处理，如果用标曲检测的话，一般而言标样溶于什么溶剂，也会处理样品使其溶于该溶剂中，最后过滤膜，上HPLC。
我也才做HPLC不久，我在想，如果直接拿上清去做，会不会有很多干扰峰啊。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-11-02 15:07:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

含笑天天

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
794378428(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+3): 这个不错 2011-11-02 16:54:12
两步处理即可：
1、10000转左右，高速离心除杂。
2、0.22微米水系滤膜过滤除杂。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-11-02 16:50:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
有的还需要萃取一下呢
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-11-02 16:54:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿静

金虫 (正式写手)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
要过膜的啦，要不然柱子会堵的
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-11-02 19:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

645329775

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
794378428(金币+1):谢谢参与
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫，同意这个说法 2011-11-03 03:53:50
一般是先萃取一下，然后10000转左右离心除杂，在0.22或0.45微米水系滤膜过滤除杂。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-11-02 19:29:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaolinkun

银虫 (小有名气)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
不能直接上柱 否则发酵液里的大颗粒物会堵住柱子的 先离心 再过膜
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-11-02 19:39:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinyongfeng

金虫 (初入文坛)
★
794378428(金币+1):谢谢参与
除离心、过膜处理后，用一定的缓冲液稀释较好
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-11-02 20:25:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙行天下lee

金虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-03 17:14:57
用微孔滤膜过滤后再进样
赞一下(2人) 回复此楼
12楼2011-11-02 23:50:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子生物化学

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-03 17:14:53
不可能直接上HPLC，它很贵滴！你一定要先粗滤，在用0.22mm滤膜过滤，不然人家不会让你的样品上柱的。
赞一下(2人) 回复此楼
13楼2011-11-03 16:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljwn2008

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-03 17:15:07
各位同学回答非常正确，不能直接上HPLC,需要精滤才行
赞一下(2人) 回复此楼
14楼2011-11-03 16:43:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dayuer_86

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by imyting at 2011-11-02 10:47:04:
不能，一般液相的管路都非常细，很容易堵的。不知楼主的产物在哪里？菌内还是菌外，包涵体还是可溶表达，处理方法虽然不同，但是大致就是提取有效成分，避免颗粒物。一般可通过离心除去……仅供参考

萃取 浓缩 使其容于配方合理的溶剂，选择流动相等条件同样很关键
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2011-11-03 21:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ycj0746

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
12000RPM,10min,重复两次,然后再用0.22um有机系滤膜过滤.
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2011-11-05 08:41:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kika8014

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫，金币好少啊 2011-11-06 18:58:01
当然不能，需要过滤除去颗粒物和菌体，然后还需要用滤膜过滤，因为发酵液成分比较复杂，可能无法很好的分出你的目标物，此时你应该先做一下萃取，初步提纯。
赞一下(2人) 回复此楼
17楼2011-11-05 09:41:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bidage880405

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Jireh at 2011-11-02 15:07:15:
一般不可以。
胞外产物先离心取上清，如果你要测的物质含量较低，那么要先浓缩处理，如果用标曲检测的话，一般而言标样溶于什么溶剂，也会处理样品使其溶于该溶剂中，最后过滤膜，上HPLC。
我也才做HPLC不久，我 ...

我想问一下，HPLC的洗脱液一般用的高纯水，那制作发酵液的时候是不是也得用高纯水？
赞一下(1人) 回复此楼
18楼2011-12-17 10:50:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bidage880405

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 含笑天天 at 2011-11-02 16:50:57:
两步处理即可：
1、10000转左右，高速离心除杂。
2、0.22微米水系滤膜过滤除杂。

我想问一下，HPLC的流动相用水的话是高纯水，像发酵液这种样品，在制作发酵液时是不是也得用高纯水？还是只需要用色谱纯把自己需要的东西从发酵液中萃取出来就行？
赞一下(1人) 回复此楼
19楼2011-12-17 10:56:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiayz1198

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 含笑天天 at 2011-11-02 16:50:57:
两步处理即可：
1、10000转左右，高速离心除杂。
2、0.22微米水系滤膜过滤除杂。

我们实验室也是这么处理的，没问题。但处理的溶液别放太久，否则还会生长菌的。
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2011-12-17 11:15:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiayz1198

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by bidage880405 at 2011-12-17 10:56:20:
我想问一下，HPLC的流动相用水的话是高纯水，像发酵液这种样品，在制作发酵液时是不是也得用高纯水？还是只需要用色谱纯把自己需要的东西从发酵液中萃取出来就行？

一般谁水就行了，没必要用高纯水。
赞一下 回复此楼
21楼2011-12-17 11:16:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2011-12-17 13:57:36
一般不可以直接进HPLC，由于不知道发酵产物是什么，而且发酵液中的固体颗粒物的粒径可能比较大，会阻塞色谱柱，所以进柱前最好用有机相膜过滤几遍，以除去固体颗粒物及某些菌，还要考虑发酵液的pH值是否在色谱柱范围之内，不在色谱柱的范围内的话还要调节pH值，再进柱~~
赞一下(2人) 回复此楼
22楼2011-12-17 11:30:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

慕枫寒

铁虫 (初入文坛)
1Wrpm 5min  ，0.22um过滤
赞一下 回复此楼
23楼2011-12-29 14:48:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hong_31

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
不能直接上液相，样品必须经过前处理之后才能上样。前处理包括离心，膜过滤，以及根据你的样品浓度选择浓缩或者稀释。
赞一下(1人) 回复此楼
24楼2011-12-29 16:58:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kellyfilm

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
微孔膜过滤处理就好了，
赞一下(1人) 回复此楼
25楼2012-02-01 09:55:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugijiang

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
发酵液很杂的，必须要先进行前处理，可以离心下先至于具体怎么处理得根据你的样品来了
赞一下 回复此楼
26楼2012-07-06 16:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

celeryjhq

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以用烘干，水浴之类的方法浓缩之后再离心过滤直接上机么？萃取的话，比方说用乙酸乙酯萃取，还需要用别的溶剂洗脱是为什么?
赞一下 回复此楼
27楼2014-03-21 11:07:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxianqin

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
虽然时间隔了很久了，还是很想问一下楼主最后是怎么做的呢？谢谢~~
赞一下 回复此楼
28楼2014-09-25 17:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qdw54321

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
至少要先离心，过滤啥的
赞一下 回复此楼
29楼2015-07-04 11:24:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 794378428 的主题更新
291/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:19 by 544594351
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 招08考数学 +8 laoshidan 2026-03-20 17/850 2026-03-25 17:52 by 一个红太阳
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 11/550 2026-03-25 10:23 by userper
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭