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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 多个亚基蛋白 ORF串联表达
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, MolEPI+1): 鼓励积极应助！ 2011-11-01 19:53:45
只做过2个ORF的。。。
（3）终止密码子只保留最后一个ORF的，前面3个的去掉，不然后面的没法翻译。
（4）最需要注意的就是阅读框，因为克隆过程中会引入多余的序列，所以设计时就必须考虑阅读框，避免密码突变。
做得不多，只能说这么点了，等高人吧。
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3楼2011-11-01 17:16:17
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智能机器人

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lwq652

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4, MolEPI+1): 很好,很热心!授予专家指数一枚! 2011-11-12 10:01:16
把stop codon 去掉是可以的，这是融合表达，GFP是用来做报告基因的，但是我感觉楼主需要的是翻译的蛋白还能组装，所以建议如果做融合表达的话在两蛋白之间加一柔性linker
当然也可以做单promoter的表达，一个promoter，基因不去除stop codon，在第二个基因之前加RBS序列

呵呵，最简单的是一个promoter加一个基因。后面再一个promoter加一个基因，才四个嘛，怕什么，人家基因组都组装起来了
赞一下(3人) 回复此楼
一念错，便觉百行皆非，防之当如渡海浮囊，勿容一针之罅漏
7楼2011-11-11 23:25:01
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