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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, MolEPI+1): 鼓励积极应助! 2011-11-01 19:53:45
只做过2个ORF的。。。
(3)终止密码子只保留最后一个ORF的,前面3个的去掉,不然后面的没法翻译。
(4)最需要注意的就是阅读框,因为克隆过程中会引入多余的序列,所以设计时就必须考虑阅读框,避免密码突变。
做得不多,只能说这么点了,等高人吧。
3楼2011-11-01 17:16:17
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智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

lwq652

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4, MolEPI+1): 很好,很热心!授予专家指数一枚! 2011-11-12 10:01:16
把stop codon 去掉是可以的,这是融合表达,GFP是用来做报告基因的,但是我感觉楼主需要的是翻译的蛋白还能组装,所以建议如果做融合表达的话在两蛋白之间加一柔性linker
当然也可以做单promoter的表达,一个promoter,基因不去除stop codon,在第二个基因之前加RBS序列

呵呵,最简单的是一个promoter加一个基因。后面再一个promoter加一个基因,才四个嘛,怕什么,人家基因组都组装起来了
一念错,便觉百行皆非,防之当如渡海浮囊,勿容一针之罅漏
7楼2011-11-11 23:25:01
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