应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 多个亚基蛋白 ORF串联表达
51/1返回列表
查看: 2252  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

mYang88

新虫 (初入文坛)

[求助] 多个亚基蛋白 ORF串联表达

请问：4个亚基的蛋白  ，4个ORF可否串联在一起 构建一个重组子表达

如果可以，那么
（1）ORF之间是否需要添加其他序列
（2）4个ORF共用一个启动子会不会影响表达效率
（3）每个ORF都要保留有完整的其实种子密码子么
（4）构建重组子时应注意哪些问题

不胜感激！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-01 10:35:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwq652

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4, MolEPI+1): 很好,很热心!授予专家指数一枚! 2011-11-12 10:01:16
把stop codon 去掉是可以的，这是融合表达，GFP是用来做报告基因的，但是我感觉楼主需要的是翻译的蛋白还能组装，所以建议如果做融合表达的话在两蛋白之间加一柔性linker
当然也可以做单promoter的表达，一个promoter，基因不去除stop codon，在第二个基因之前加RBS序列

呵呵，最简单的是一个promoter加一个基因。后面再一个promoter加一个基因，才四个嘛，怕什么，人家基因组都组装起来了
赞一下(3人) 回复此楼
一念错，便觉百行皆非，防之当如渡海浮囊，勿容一针之罅漏
7楼2011-11-11 23:25:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

mYang88

新虫 (初入文坛)
纠正。。。。（3）每个ORF是否需要保留完整的终止密码子
赞一下 回复此楼
2楼2011-11-01 10:36:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, MolEPI+1): 鼓励积极应助！ 2011-11-01 19:53:45
只做过2个ORF的。。。
（3）终止密码子只保留最后一个ORF的，前面3个的去掉，不然后面的没法翻译。
（4）最需要注意的就是阅读框，因为克隆过程中会引入多余的序列，所以设计时就必须考虑阅读框，避免密码突变。
做得不多，只能说这么点了，等高人吧。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-01 17:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mYang88

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-01 17:16:17:
只做过2个ORF的。。。
（3）终止密码子只保留最后一个ORF的，前面3个的去掉，不然后面的没法翻译。
（4）最需要注意的就是阅读框，因为克隆过程中会引入多余的序列，所以设计时就必须考虑阅读框，避免密码突变。 ...

可是如果中间的终止密码子去掉翻译出来不就成了一条肽链么？
赞一下 回复此楼
4楼2011-11-01 17:59:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭