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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 绿色荧光的观察
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yesucao

木虫 (正式写手)

[求助] 绿色荧光的观察

看文献上有人说：菌体绿色荧光的观察可以直接在紫外灯下看到。
我想问一下各位：
1、紫外灯就是平时操作台上的紫外灯就可以吗？？还是说需要特定波长的紫外灯，比如480nm的？？
2、紫外灯照射30s的话应该对菌体没有什么特别的影响吧？照射背景选择黑色的吧？？
3、GFP标记的菌株如果在紫外灯下没有看到荧光的话，是不是就能肯定真的没有发荧光了啊？？
4、紫外灯下观察菌体发荧光的时候，需要在平板上培养多长的时间才能观察得到？？
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1楼 2011-10-31 16:26:12
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yangzizi8325

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3342564楼: Originally posted by yesucao at 2011-11-02 08:53:17:
请问你所说的破碎跑电泳指的是跑SDS-PAGE吗？？？我跑过一次，只是没转的条带有点模糊，转了的倒是挺清晰的，所以就没参照，准备在跑一次。
那我的胶经染色脱色后，还能在紫外下照射吗？？已经泡了好几天的？？

你是转的GFP基因进去的？如果那样电泳检测也能看到那条带啊
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好好的学
13楼2012-04-17 11:01:42
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xiemin217

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 鼓励发帖交流！ 2011-10-31 18:26:21
yesucao(金币+2): 谢谢回复 2011-11-01 08:49:32
GFP可以用紫外激光看肯定没有问题，但是对活体细胞有杀伤。
菌体绿色荧光的观察可以直接在紫外灯下我没有做过，不清楚，要看看到荧光你还需要考虑光能不能进去，还有荧光能不能出来。
简单的办法就是直接试试，这个很容易做到。
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2楼2011-10-31 16:48:29
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
yesucao(金币+18): 2 2011-11-01 08:50:02
wanhscn(金币-14): 楼主反馈：本来是发2个金币，扣14金币，总共发4个金币，谢谢理解！ 2011-11-01 08:56:11
wanhscn(金币+5): 鼓励专家应助回帖，谢谢！ 2011-11-01 08:59:34
引用回帖:
1楼: Originally posted by yesucao at 2011-10-31 09:26:12:
看文献上有人说：菌体绿色荧光的观察可以直接在紫外灯下看到。
我想问一下各位：
1、紫外灯就是平时操作台上的紫外灯就可以吗？？还是说需要特定波长的紫外灯，比如480nm的？？
2、紫外灯照射30s的话应该对菌体 ...

480nm 是可见光，紫外灯激发的是395nm的那个激发峰
赞一下(2人) 回复此楼
不让吃就去死
3楼2011-10-31 17:39:03
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-11-01 09:04:35
菌体表达蛋白的话直接日光就能看见吧   为什么是在平板上观察  平板上能表达出蛋白吗
赞一下(1人) 回复此楼
hold住
4楼2011-10-31 18:58:27
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