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cpugaga

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[求助] 酶切问题求助

各位大侠，想请教一个问题，还希望大家不吝赐教啊！最近在做双酶切就是分别用BamH1和Not1酶切，以前的时候切两个小时都没事，现在只是切50分钟就老是切得弥散了，把质粒全切散了，一开始怀疑提质粒的问题（乙醇残留，留有杂蛋白什么的），但是重新提取质粒后还是这样这是什么原因啊？还望大家帮帮我这个无助的孩纸啊...俺已经做了好多次了每次切了40分钟的时候就胶回收，但是胶回收的效果是一点也不好啊呵呵

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1楼 2011-10-30 09:10:47

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cpugaga

金虫 (小有名气)

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quiller2000(金币+2): 呵呵，鼓励交流 2011-10-31 08:51:26

引用回帖:

4楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-10-30 23:20:19:
你可以需要检查一下你的系统是否可能含有DNA酶
最好的办法是所有的东西重新做。但是如果你对这个问题比较清楚，可以这样来做：
1，用你的酶系统去切你们课题组其它同志的质粒，确定是不是酶系统有问题，包括问 ...

好的我再试试吧谢谢了不过我又提了一下质粒现在稍微有点改善但是时间长了还是有点问题同一个课题组的他们是之前切得效果还好但是我现在再切就不好了当然那个酶我用的都是所剩不多的（人家用剩下的）....我怀疑是酶的问题....谢谢了我再试试