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喵汪银虫 (小有名气)
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怎样连接抗体和生物素？sulfo-NHS-LC-biotin在哪里买？
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楼主是学化学的，课题倾向生物，最近要用到许多生物试剂。要做抗体的生物素化，文献里用到了NHS、EDC等，但是做抗体和亲和素的连接这一步却用的不是NHS、生物素、抗体，而是sulfo-NHS-LC-biotin和抗体，不知道这是什么物质，在哪里可以买到？ 或者有没有大侠可以提供抗体生物素化的其他可靠方法呢？下面是文献里的方法，抗体的浓度好大，我们用的是另一种抗体，买来的浓度是10毫克/毫升，450元一毫克，要是用这种浓度的话，表示烧不起啊！最后一定要用Sephadex分离纯化么，实验室没有这种设备啊！ ~4.5 mg of sulfo-NHS-LC-biotin was added to 1 mL of ~ 90 mg/mL anti-CRP PBS solution (pH 7.2), and the reaction was allowed to proceed for ~30 min at room temperature. Free biotin molecules were subsequently removed by a Sephadex G-25 PD-10 desalting column. |
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