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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » T载体连接问题
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hellolin

金虫 (小有名气)

[求助] T载体连接问题

现在在做5，RACE。扩增出目的条带后胶回收，然后用特异性引物去嵌套验证，结果也有目的大小的条带扩增出来，这应该可以说明胶回收的目的片段是正确的。但是用T载体连接后转化到大肠杆菌中挑斑验证时用同样的嵌套引物去验证却没有扩增出条带，请问这是为什么啊？
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scienceguy
1楼 2011-10-28 11:19:56
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xiaohaozi9876

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

有clony说明克隆成功，估计你做克隆pcr做的不熟练，没有加进sample

我比较讨厌做克隆pcr，很烦躁感觉，每次直接划线，接种，提质粒  哈哈哈
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Onceinamoment,wethinkoneselfgrowup,oneday,wefinallyfound...
9楼2011-10-31 16:24:19
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

楼主的片段多长，是否带A？
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jiayoubashaonian
2楼2011-10-28 11:23:07
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hellolin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-10-28 11:23:07:
楼主的片段多长，是否带A？

片段1K左右，不是PCR产物一般都带A的吗
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scienceguy
3楼2011-10-28 11:26:58
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-31 16:48:01
首先能确定连上了吧。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2011-10-28 11:33:47
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