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xuhua257

木虫 (小有名气)

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[求助] 求助高手有关RT-PCR

如题，之前是内参基因扩不出来，今天重新扩了下，勉强出来一个条带，但有很多拖尾的现象，想求助高手，分析下原因。十分感谢！
前4个泳道是内参基因的，后面几个是要扩的基因，现在是要扩的基因能够P出来但内参的不行，着急啊。且用了35个循环，退火温度为50℃。

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1楼 2011-10-27 19:31:11

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xuhua257

木虫 (小有名气)

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引用回帖:

5楼: Originally posted by amilie030312 at 2011-10-28 13:21:35:
估计是你温度没找对，我觉得内参基因引物肯定不会有问题啦，那就先想温度了呗，做个梯度，保准没问题。顺便说一句，DNA的扩增用不着那么多循环，如果不是用高保真酶很容易出现错配的。

好的我先试一试谢谢！