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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 地学 » 土壤学 » 微生物量碳测定？
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xiaoyang1202

金虫 (小有名气)

[求助] 微生物量碳测定？ 已有1人参与

向大家请教下：我的是淹水土壤（稻田土），我根据淹水土壤微生物量碳的测定方法：
a.熏蒸
用吸管弃去淹水土壤的淹水层（保留微薄水层），被去除淹水层的土样混匀后用土壤提取器取约相当于10.0g烘干土重的新鲜土壤3份，放入100ml的离心管中，记录新鲜土重。然后加入0.4-0.6ml无乙醇氯仿，拧紧盖子，用旋涡振荡器混匀，混匀后把离心管放入干燥器中，在25℃的黑暗条件下放置24小时。在熏蒸处理的同时，取3份土样用于土壤含水量的测定，并设未熏蒸对照土样3份。
b.提取
在上述离心管中，加45ml 0.5mol/L K2SO4溶液，在振荡机上振荡浸提30min，（300r/min），过滤（过滤前可低速离心）得到提取液。然后把熏蒸土样提取液转入薄壁玻璃试管中，未熏蒸土样提取液则转入带盖的容器中。
c.水浴排氯仿
对含提取液的玻璃试管称重后，把它们放入100℃水浴中。待水沸腾时开始计时，45-60min后，去除试管，冷却后称重，补足损失的水分，混匀后转入带盖的容器中。
我做实验的时候特别怕氯仿排不干净，所以我在熏蒸 步骤中做了个对照（无土+氯仿），发现水浴后用TOC测定时，有有机碳，在15mg/L左右。
这是由于氯仿没排干净导致的吗？有没有什么办法可以解决啊？
急啊，请大家帮帮忙
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土壤固碳科学

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1楼 2011-10-27 15:19:30
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455101298

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

额..............氯仿熏蒸是用个小烧杯装氯仿,放在干燥器里面然后抽真空让氯仿沸腾,熏蒸土壤.
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4楼2011-11-19 10:49:17
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nxd8088

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiaoyang1202(金币+5): 谢谢，应该没问题，这是淹水土壤的提取方法 2011-11-06 14:41:50
你的熏蒸是不是有问题？我觉得这种熏蒸方法可能导致氯仿不容易排尽而大量残留。我们曾经做过抽滤干燥器内，将其抽成低压沸腾几分钟，这样就容易排完，而且效果也还可以。
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hehhehhh
2楼2011-10-28 19:32:56
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shuipei807

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xiaoyang1202(金币+5): 谢谢，应该没问题，这是淹水土壤的提取方法，呵呵 2011-11-06 14:42:05
我也是第一次见到你这样的方法熏蒸，怎么把氯仿直接加到 土样中呢？建议你看看吴金水的微生物碳氮测定。书中写的很详细的。
我现在也刚刚做熏蒸，也是用真空干燥器的！
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学别人最好，做自己更好！
3楼2011-10-28 23:03:23
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xuxiaoran

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个方法是浙江大学黄昌勇教授的团队对氯仿熏蒸法的修改，主要是为了适应长期淹水的稻田，因为稻田的特殊性导致用吴金水的方法（气态氯仿熏蒸）会导致土壤水分环境变化，肯定对微生物多样性产生影响。但是黄昌勇的方法也值得推敲，主要原因是样品与氯仿如何混匀（混匀度的 把握）、熏蒸后的氯仿去除问题等，我也用这个方法作用，但是结果很不理想，因此就没有做了。淹水稻田土壤微生物量的测定方面还有很长的路要走。
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5楼2011-11-19 15:39:04
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