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xiaoyang1202

金虫 (小有名气)

[求助] 微生物量碳测定? 已有1人参与

向大家请教下:我的是淹水土壤(稻田土),我根据淹水土壤微生物量碳的测定方法:
a.熏蒸
用吸管弃去淹水土壤的淹水层(保留微薄水层),被去除淹水层的土样混匀后用土壤提取器取约相当于10.0g烘干土重的新鲜土壤3份,放入100ml的离心管中,记录新鲜土重。然后加入0.4-0.6ml无乙醇氯仿,拧紧盖子,用旋涡振荡器混匀,混匀后把离心管放入干燥器中,在25℃的黑暗条件下放置24小时。在熏蒸处理的同时,取3份土样用于土壤含水量的测定,并设未熏蒸对照土样3份。
b.提取
在上述离心管中,加45ml 0.5mol/L K2SO4溶液,在振荡机上振荡浸提30min,(300r/min),过滤(过滤前可低速离心)得到提取液。然后把熏蒸土样提取液转入薄壁玻璃试管中,未熏蒸土样提取液则转入带盖的容器中。
c.水浴排氯仿
对含提取液的玻璃试管称重后,把它们放入100℃水浴中。待水沸腾时开始计时,45-60min后,去除试管,冷却后称重,补足损失的水分,混匀后转入带盖的容器中。
我做实验的时候特别怕氯仿排不干净,所以我在熏蒸 步骤中做了个对照(无土+氯仿),发现水浴后用TOC测定时,有有机碳,在15mg/L左右。
这是由于氯仿没排干净导致的吗?有没有什么办法可以解决啊?
急啊,请大家帮帮忙
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shuipei807

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xiaoyang1202(金币+5): 谢谢,应该没问题,这是淹水土壤的提取方法,呵呵 2011-11-06 14:42:05
我也是第一次见到你这样的方法熏蒸,怎么把氯仿直接加到 土样中呢?建议你看看吴金水的微生物碳氮测定。书中写的很详细的。
我现在也刚刚做熏蒸,也是用真空干燥器的!
学别人最好,做自己更好!
3楼2011-10-28 23:03:23
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nxd8088

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiaoyang1202(金币+5): 谢谢,应该没问题,这是淹水土壤的提取方法 2011-11-06 14:41:50
你的熏蒸是不是有问题?我觉得这种熏蒸方法可能导致氯仿不容易排尽而大量残留。我们曾经做过抽滤干燥器内,将其抽成低压沸腾几分钟,这样就容易排完,而且效果也还可以。
hehhehhh
2楼2011-10-28 19:32:56
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455101298

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

额..............氯仿熏蒸是用个小烧杯装氯仿,放在干燥器里面然后抽真空让氯仿沸腾,熏蒸土壤.
4楼2011-11-19 10:49:17
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xuxiaoran

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个方法是浙江大学黄昌勇教授的团队对氯仿熏蒸法的修改,主要是为了适应长期淹水的稻田,因为稻田的特殊性导致用吴金水的方法(气态氯仿熏蒸)会导致土壤水分环境变化,肯定对微生物多样性产生影响。但是黄昌勇的方法也值得推敲,主要原因是样品与氯仿如何混匀(混匀度的 把握)、熏蒸后的氯仿去除问题等,我也用这个方法作用,但是结果很不理想,因此就没有做了。淹水稻田土壤微生物量的测定方面还有很长的路要走。
5楼2011-11-19 15:39:04
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