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yalan_p

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达蛋白诱导不出来

最近用pGEX-4T-1构建了一个融合蛋白的表达载体,测序结果显示没有出现碱基的位移和变异,但是做诱导的时候却一直没有目的蛋白,我的蛋白在23kD左右,GST标签为26kD,诱导后在50kD左右应有比较亮的条带,但是SDS电泳显示30摄氏度诱导4h后的蛋白表达与对照是一样的。上清和沉淀都分别做了电泳,都是一样的结果。
    请教高手,这种情况我该怎么办?可能是什么原因?该如何进一步优化条件?
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547star

木虫 (著名写手)

买个GST抗体做WB吧。
为什么
7楼2011-10-27 18:03:39
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