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2011加油

银虫 (正式写手)


[交流] 请做过westernblot实验的战友前来赐教

最近我在做westernblot实验,遇到一些问题,特发此贴,以求指导。
1、由于我提的是核蛋白,浓度很低,上样体积受到梳子孔径的限制,所以蛋白的上样量只有几个微克左右。现在要问的是,大家提取核蛋白,种细胞时,是采用6孔板还是培养皿种板呢?

2、在进行ECL发光实验时,发现膜上有荧光,但压片曝光后,发现胶片上只有膜的黑印记,却无任何条带,求解释??

望大家不吝赐教,非常感谢!
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2011加油

银虫 (正式写手)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 青豆同学 at 2011-10-23 10:08:25:
我这边一般都是曝光10秒左右,黑乎乎的一片,应该是跟曝光时间有关

哦,请问你的蛋白上样量是多少,分子量大小及转膜条件?
8楼2011-10-23 12:50:32
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hf2016

金虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
2011加油(金币+1): 谢谢回答 2011-10-22 10:42:46
wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-10-22 15:26:08
我们用的培养瓶为了增加上样量都用五乘

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2011-10-22 10:40:14
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青豆同学

铜虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
2011加油(金币+1): 谢谢,希望继续多帮忙分析。 2011-10-22 14:28:04
曝光时间长了吧?
3楼2011-10-22 13:15:59
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2011加油

银虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by 青豆同学 at 2011-10-22 13:15:59:
曝光时间长了吧?

大概2-3min,这应该不算久啊。
5楼2011-10-22 14:26:00
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