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请做过westernblot实验的战友前来赐教
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2011加油
银虫
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虫号: 1210848
[交流]
请做过westernblot实验的战友前来赐教
最近我在做westernblot实验,遇到一些问题,特发此贴,以求指导。
1、由于我提的是核蛋白,浓度很低,上样体积受到梳子孔径的限制,所以蛋白的上样量只有几个微克左右。现在要问的是,大家提取核蛋白,种细胞时,是采用6孔板还是培养皿种板呢?
2、在进行ECL发光实验时,发现膜上有荧光,但压片曝光后,发现胶片上只有膜的黑印记,却无任何条带,求解释??
望大家不吝赐教,非常感谢!
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1楼
2011-10-22 09:36:45
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2011加油
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12楼
:
Originally posted by
jakelly
at 2011-10-23 19:20:07:
用宽的梳子做样品孔可以增加上样量,条带的问题很可能是暴光时间太长。我们一般压10秒左右,最多一两分钟。
这位朋友你好,我想问一下,即使没看到荧光的情况下,曝光时间也是这么短???
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13楼
2011-10-23 20:28:29
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hf2016
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
2011加油(金币+1): 谢谢回答 2011-10-22 10:42:46
wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-10-22 15:26:08
我们用的培养瓶为了增加上样量都用五乘
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼
2011-10-22 10:40:14
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青豆同学
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虫号: 1398482
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
2011加油(金币+1): 谢谢,希望继续多帮忙分析。 2011-10-22 14:28:04
曝光时间长了吧?
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3楼
2011-10-22 13:15:59
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2011加油
银虫
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3楼
:
Originally posted by
青豆同学
at 2011-10-22 13:15:59:
曝光时间长了吧?
大概2-3min,这应该不算久啊。
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5楼
2011-10-22 14:26:00
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