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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请做过westernblot实验的战友前来赐教
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2011加油

银虫 (正式写手)

[交流] 请做过westernblot实验的战友前来赐教

最近我在做westernblot实验，遇到一些问题，特发此贴，以求指导。
1、由于我提的是核蛋白，浓度很低，上样体积受到梳子孔径的限制，所以蛋白的上样量只有几个微克左右。现在要问的是，大家提取核蛋白，种细胞时，是采用6孔板还是培养皿种板呢？

2、在进行ECL发光实验时，发现膜上有荧光，但压片曝光后，发现胶片上只有膜的黑印记，却无任何条带，求解释？？

望大家不吝赐教，非常感谢！
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1楼 2011-10-22 09:36:45
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2011加油

银虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by jakelly at 2011-10-23 19:20:07:
用宽的梳子做样品孔可以增加上样量，条带的问题很可能是暴光时间太长。我们一般压10秒左右，最多一两分钟。

这位朋友你好，我想问一下，即使没看到荧光的情况下，曝光时间也是这么短？？？
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13楼2011-10-23 20:28:29
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hf2016

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
2011加油(金币+1): 谢谢回答 2011-10-22 10:42:46
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-10-22 15:26:08
我们用的培养瓶为了增加上样量都用五乘

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-10-22 10:40:14
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青豆同学

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
2011加油(金币+1): 谢谢，希望继续多帮忙分析。 2011-10-22 14:28:04
曝光时间长了吧？
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-22 13:15:59
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2011加油

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 青豆同学 at 2011-10-22 13:15:59:
曝光时间长了吧？

大概2-3min，这应该不算久啊。
赞一下 回复此楼
5楼2011-10-22 14:26:00
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