24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2805  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我很囧

铁虫 (小有名气)

[求助] ssDNA形成dsDNA

最近试验中,单链DNA(标记FAM)与互补链形成dsDNA后荧光值升高了一倍左右,请问为何这样?不知道是否形成了所要的双链。
怎样条件:如反应多久或怎么操作下才能使两条互补单链形成双链较完全?如何简单验证双链的形成?请高手指点。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

610952845

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by likeyangff at 2011-10-24 20:35:00:
高于TM温度,不就解链的吗?

请问如何确定TM温度?谢谢!
8楼2011-11-02 19:41:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

更深的蓝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): Good!鼓励应助! 2011-10-22 21:25:13
我很囧(金币+2): 2011-10-24 08:19:31
至于有没有形成双链的DNA,可以用聚丙烯酰胺凝胶电泳验证。一般情况下,完全互补的ssDNA等比例混合后,在高于Tm值的温度下孵育几分钟,然后缓慢冷却到室温。
低调务实!
2楼2011-10-22 19:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

likeyangff

木虫 (初入文坛)

高于TM温度,不就解链的吗?
3楼2011-10-24 20:35:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我很囧

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by likeyangff at 2011-10-24 20:35:00:
高于TM温度,不就解链的吗?

所以叫退火啊。呵呵
4楼2011-10-24 20:48:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见