| 查看: 1232 | 回复: 1 | |||
| 本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看 | |||
lijunqing525金虫 (正式写手)
|
[求助]
包涵体蛋白纯化
|
||
| 大肠杆菌中包涵体已经在含8M尿素的tris-hcl中裂解了，后面怎样除去高浓度的尿素，用什么溶液？咋样纯化得出我所需的目的蛋白？望高手指教。 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有10人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 咪唑对离子交换层析的影响？包涵体蛋白纯化过程中如何检测蛋白浓度？
已经有1人回复
- GST融合蛋白包涵体如何纯化？
已经有6人回复
- 纯化的包涵体蛋白透析后怎么没有了？
已经有7人回复
- 蛋白原核表达和包涵体纯化问题
已经有8人回复
- 包涵体蛋白纯化
已经有2人回复
- 包涵体蛋白的用透析法的纯化方法
已经有1人回复
- 包涵体纯化
已经有17人回复
- 【教程】包涵体蛋白的纯化和复性
已经有16人回复
- 高效液相纯化包涵体蛋白
已经有4人回复
- 包涵体蛋白纯化不溶解，怎麽办？
已经有20人回复
- 重组蛋白 包涵体处理 蛋白纯化
已经有1人回复
- 包涵体洗涤纯化
已经有0人回复
【答案】应助回帖
lijunqing525(金币+30, 博学EPI+1): 10 2011-10-17 18:52:32
|
可以先进行蛋白浓缩处理，如果你觉得必要，但我个人在上柱之前从不浓缩，干吗要多一个步骤呢，层析本来就会有浓缩的作用。 2. 蛋白浓缩方法在实验室做还是PEG比较简单，只需要一个透析袋就够了。但我个人喜欢超虑，不好意思。不建议用(NH4)2SO4沉淀或丙酮沉淀。 3. 不管用哪种方法浓缩，如果浓度一上去蛋白就大量沉淀，那对不起请重新优化你的复性方案。但也请避免过量浓缩蛋白，如果一个蛋白在2mg/ml以下是稳定的，那就千万不要浓缩到3mg/ml。 4. 8M尿素一般情况下是不会影响你的挂柱的。 5. 用PEG干粉包埋透析袋的方法进行蛋白浓缩的时候，所有的小分子（只要分子量小于透析袋截留分子量的）都可以自由进出。一般实验室我见过的用10KD左右的透析袋比较多，我想你应该也是用这种的，所以请不要用PEG6000的干粉了，你不是在做浓缩，你是在做PEG沉淀，因为你的PEG都跑透析袋里去了。 |
2楼2011-10-17 15:35:13
