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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC 样品咋被冲下来了?

如题,小弟最近用分析HPLC来制备,10mg样品溶解到0.4ml的流动相(55%甲醇:45%水)里,每次进针15uL,主峰在15min左右出峰,但2~5min会出现很高的杂峰(和主峰差不多高),我把这些杂峰收集(未浓缩),进样发现有主峰!难道是样品直接被冲下来了?如何避免?(如果是进样量太大,那为何第二张图2~5min还是有不规则的杂峰?)

样品进样



杂峰收集进样
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by tshcdm at 2011-10-18 11:03:39:
第二个图的主峰峰高很小,有可能就是会有这样的,建议你收集别的时间的样品,看看有没有主峰出现?

第二个峰是我从10ml的收集液里面取15ul进样的,主峰峰高就小了,第一张图的浓度比第二张图大多了
以无法为有法,以无限为有限
23楼2011-10-18 12:47:34
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

引用回帖:
24楼: Originally posted by tshcdm at 2011-10-18 14:06:58:
是的,我的意思是你看看别的时间段是不是也有这样的主峰出现,会不会是浓度高,别的时间段也有呢?

好的,我这东西浓度肯定是高的,主峰在在主峰出来之前,基线一直降不到0,大概在50mUA,等主峰出完,基线就降到0了,我发现,我进样进的多,主峰峰面积就大,所以我干脆加大进样量,然后把前面冲下来的再分一次~
以无法为有法,以无限为有限
25楼2011-10-18 21:58:08
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