应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 转化遭遇红霉素对大肠杆菌失效！
51/1返回列表
查看: 3541  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

cicilyok

新虫 (初入文坛)

[求助] 转化遭遇红霉素对大肠杆菌失效！ 已有1人参与

各位同学：
       我现在准备将表达载体pMG36e转入大肠杆菌，转化之后平板(红霉素终浓度250ug/ml)上长满菌（现象如抗生素失效一样），但是红霉素配好之后是经过验证有效的。从转化平板上挑起来的菌转入液体培养基（红霉素终浓度200ug/ml），12小时不长，24小时就长。我已经卡在这一步很久了，望大家不吝赐教~~~感激不尽！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-17 00:15:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5): 不错的建议 2011-10-19 12:59:35
cicilyok(金币+2): PCR验证过没有条带 2011-10-19 21:26:53
你可以不通过单纯验证抗性来鉴定转化子。12小时不长，24小时长可能是抗生素长时间失效，或是抗生素浓度只是达到抑制其生长，16小时左右就会长起来。你可以把你弄出来的转化子提取质粒，或是跑个PCR，验证一下，应该比单纯依据抗性来判断要准确
赞一下(1人) 回复此楼
没有比脚更长的路，没有比人更高的山
5楼2011-10-19 10:47:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★
zhang8826857(金币+1): 鼓励积极回帖^_^ 2011-10-17 09:04:21
换载体
用pET系列的
赞一下(1人) 回复此楼
小木虫之有关部门负责人
2楼2011-10-17 01:16:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励积极回帖交流^_^ 2011-10-17 22:24:22
cicilyok(金币+2): 我也正准备试试 2011-10-19 09:27:46
大肠杆菌本身就能抗很高的红霉素，要不做个梯度试试看，还有红霉素的稳定性如何？
我就偶尔做过，你查查相关文献吧。
赞一下(1人) 回复此楼
微生物发酵
3楼2011-10-17 19:47:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicilyok

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by scelab at 2011-10-17 01:16:22:
换载体
用pET系列的

我用pMG36e是因为下一步要转乳酸菌做表达，所以载体不能换吧
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-19 09:29:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 17:25 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 面上意见出来了 +9 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 18/900 2026-08-30 16:47 by 黄鸟于飞Chao
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 14:05 by GkCVyODlx4mR
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 6/300 2026-08-30 13:54 by GkCVyODlx4mR
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +6 德尚中行 2026-08-27 7/350 2026-08-30 12:53 by Bxndjjd
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:17 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭