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荧光定量PCR无 Ct 值（信号）出现的解决对策 已有1人参与
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1.1 反应循环数不够：一般都要在 35 个循环以上，可根据实验情况增加循环，但高于45个循环会增加过多的背景信号。 1.2 检测荧光信号的步骤有误：一般采用 72℃延伸时采集荧光，Taqman 方法则一般在退火结束或延伸结束采集信号。 1.3 引物或探针降解：可通过PAGE电泳检测其完整性。 1.4 探针设计不佳：设计探针温度低于引物，造成探针未杂交上而产物已延伸。 1.5 模板量少：对未知浓度的样品应从系列稀释样品的最高浓度做起。 1.6 模板降解：避免样品制备中杂质的引入以及模板反复冻融的情况发生。 |
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2楼2011-11-05 15:02:00