24小时热门版块排行榜    

查看: 1363  |  回复: 8

pidou213

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质表达沉淀如何定量?

蛋白质表达,酵母破碎后,沉淀中的蛋白质如何定量?
回复此楼
见得多爱的多
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuxia82012

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

pidou213(金币+2): 谢谢 2011-10-11 23:02:31
引用回帖:
1楼: Originally posted by pidou213 at 2011-10-11 12:07:45:
蛋白质表达,酵母破碎后,沉淀中的蛋白质如何定量?

试试相对定量,用SDS-Page胶跑完后,拿具体浓度的BSA作为对照,对比条带亮度,软件分析即可
在等待中涅槃重生
2楼2011-10-11 13:06:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaolandragon

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

请问为啥要定量呢?
Never_regret.If_it's_good,it's_wonderful.If_it's_bad,it's_experience.
3楼2011-10-11 14:01:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuxia82012 at 2011-10-11 13:06:32:
试试相对定量,用SDS-Page胶跑完后,拿具体浓度的BSA作为对照,对比条带亮度,软件分析即可

还是有道理的,但是那样太麻烦啦
见得多爱的多
4楼2011-10-11 23:02:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gaolandragon at 2011-10-11 14:01:25:
请问为啥要定量呢?

做蛋白的时候不定量的话 怎么能说明问题呢?
见得多爱的多
5楼2011-10-11 23:03:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by pidou213 at 2011-10-11 23:02:09:
还是有道理的,但是那样太麻烦啦

用凯氏定氮法更麻烦!
真相是最大的奢侈品
6楼2011-10-12 09:11:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sfb1020

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-10-13 12:29:08
在沉淀中加上样缓冲液,煮沸,离心,取上清用lowry法定量,我们实验室就是这么做的。蛋白上样缓冲液网上有配方。
7楼2011-10-12 11:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pidou213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by sfb1020 at 2011-10-12 11:15:50:
在沉淀中加上样缓冲液,煮沸,离心,取上清用lowry法定量,我们实验室就是这么做的。蛋白上样缓冲液网上有配方。

取上清的话,那岂不是还是需要将蛋白溶解在缓冲液中才行。可是我的蛋白是膜蛋白,我觉得蛋白恐怕不溶解在上样缓冲液中啊
见得多爱的多
8楼2011-10-13 00:08:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoshidemei

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-10-13 12:29:21
用BCA法就可以测定
9楼2011-10-13 11:23:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 pidou213 的主题更新
信息提示
请填处理意见