24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1041  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

暗夜懒猫

银虫 (小有名气)

[求助] 载体构建成功下一步遇难

好不容易构建成功了一个载体,在把提取的质粒导入表达受体细胞,涂卡那抗性的板长出菌落,但挑取菌落用液体培养基培养,做菌液PCR检测目的基因条带时,却没有条带出现。请问各位高手这是怎么回事?是质粒没导进去?还是质粒丢失了呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暗夜懒猫

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 红多多 at 2011-10-04 22:42:03:
呵呵,你是不是用的PET载体啊
1.看清楚你用的感受态细胞能不能接受这类的的载体哦,Origami™ B系列的菌对kan是不敏感的,如果你实在需要保证蛋白二硫键的形成,可以考虑换成Origami™ 2系列的感受态。 ...

我选用的是PET28a载体,受体细胞是大肠杆菌BL21(DE),见有文献是这么用的,不知道用在我这里适不适合。 什么抗性不是针对载体来说的吗,载体是kan抗性的,那么菌体不应该抗kan吗? 是这样吗? 请多指教!
4楼2011-10-05 08:26:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暗夜懒猫

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 天使托 at 2011-10-05 09:32:28:
这种情况太正常了,有可能是你没有连接成功!
做一个PCR验证就行了。。。如果不对继续做。。。

验证过连接成功了,才提前质粒导入到表达受体细胞中啊。
6楼2011-10-05 10:40:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 暗夜懒猫 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +9 花田半亩~白 2026-04-21 9/450 2026-04-22 16:50 by zhouyanli11
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +5 yexuqing 2026-04-19 5/250 2026-04-22 10:01 by easeheart
[论文投稿] 急需审稿人!!! +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考博] 申博 +3 Xyyx. 2026-04-18 3/150 2026-04-20 10:44 by YuY66
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 260求调剂 +4 Zyt1314520.. 2026-04-17 5/250 2026-04-18 08:28 by babysonlkd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
请填处理意见