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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR电泳，加样孔很亮，但目的条带却很淡，不知道怎么回事？
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huzhihong-

新虫 (小有名气)

[交流] PCR电泳，加样孔很亮，但目的条带却很淡，不知道怎么回事？ 已有18人参与

如题，以胶回收产物为模板，进行第二轮PCR，做了三次，每次都是点样孔很亮，目的条带很淡，不知道为什么？请高手赐教！
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1楼 2011-10-02 20:37:10
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angusqing

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
分子量太大或者说蛋白质的问题吧，感觉根本没跑开
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木秀于林而风必摧之
20楼2011-10-07 18:36:05
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粥香可爱

铜虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利！ 2011-10-07 13:51:32
切胶的时候没有切到别的条带吗？有没有阴性对照，可能PCR体系有污染
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莫负家国与红颜
2楼2011-10-02 22:44:23
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粥香可爱

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
胶回收的产物没有超螺旋吗？亮的带在后面，会不会是超螺旋的质粒跑不动？
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莫负家国与红颜
3楼2011-10-02 23:01:38
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chenguestc

木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利！ 2011-10-07 13:51:40
你的MARKER是对的，说明胶的问题不是很大（但也可能是影响因素）。
可能的原因是：（1）DNA不纯，里面蛋白质过多。
              （2）梳子非常不干净，有杂质在点样孔里
              （3）胶的浓度（过大或过小）不适合你的PCR产物
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huzhihong-
4楼2011-10-03 09:35:30
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