24小时热门版块排行榜    

查看: 7456  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zxd95

至尊木虫 (著名写手)


[交流] 激光共聚焦显微镜观察烟草中的GFP蛋白

上学期做了转录因子基因与EYFP的融合表达载体,现在有了转基因植物,基因组PCR也检测到了基因,再进行RT-PCR进行验证。下面就要进行YFP的荧光观察,但是我没有做过这方面的实验。请使用过激光共聚焦显微镜观察过荧光蛋白的虫友进行指导。听说直接观察烟草叶片就可以了?是这样吗?
此外,观察前要对转基因烟草叶片进行怎样的处理,取什么时期或什么部位的叶片(幼叶片还是老叶片)?怎样观察?观察一个样片的价格一般是多少?
谢谢了!
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxd95

至尊木虫 (著名写手)


引用回帖:
7楼: Originally posted by youzhi-l at 2014-11-05 12:58:16
还没有做过亚细胞定位的实验没法回答你的问题,但是看到你的内容想问下你关于基因组PCR的问题。我自己一直在做转基因烟草的鉴定工作,但是始终不能得到合适的结果,就是我用全世金公司的supermix酶扩增出来很多非特 ...

PCR获得条带后,连T载体,测序看对不对。暂不必纠结退火温度。
8楼2014-11-07 21:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

w2boluo

金虫 (小有名气)



zxd95(金币+1):谢谢参与
zxd95(金币+1): 谢谢,看来普通荧光显微镜只能使用原生质体了;我是看定位的。 2011-10-02 23:14:45
建议先用一般的荧光显微镜对转基因株系进行筛选。荧光产率在不同line中相差较大。
转录因子融合gfp一般也就是看个核定位,普通荧光显微镜足够。
叶片直接撕去下表皮,切小块泡在液体培养基或者缓冲液中就可以镜检。如果想获得较好的图像,可以考虑将叶肉细胞原生质化。
3楼2011-10-02 20:18:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vcvcvc

木虫 (著名写手)


★ ★
zxd95(金币+1):谢谢参与
zxd95(金币+1): 谢谢,是看蛋白的亚细胞定位的! 2011-10-03 18:27:33
西瓜(金币+1): good! 2011-10-04 00:42:02
不是质体定位的话,直接敲根尖。否则要游离原生质体
4楼2011-10-03 12:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxd95(金币+1):谢谢参与
zxd95(金币+1): 我在昆明,是昆明理工大学的! 2011-10-04 10:43:27
不知道你在哪儿,我们可以帮你看;你那个是植物细胞,很好看的!呵呵
5楼2011-10-03 22:58:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:51 by xiangy672
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 面上意见出来了 +10 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 19/950 2026-08-31 08:01 by blueearth171
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见