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hcswj

木虫 (小有名气)

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[交流] 菜鸟请教两个简单的问题，DNA杂交

1、两段互补的引物，是不是一定要反向杂交，即A链5'端到3'端与B链3'端到5'端依次互补才可以？我有一点模糊的印象，以前生物课好像讲过，但是记不清楚了。
2、如何验证两条链是否杂交成功，有什么简单的方法吗？以及如何计算杂交率。

谢谢！

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1楼 2011-10-01 15:03:26

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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

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★
hcswj(金币+1):谢谢参与
hcswj(金币+5): 很感谢~ 2011-10-05 12:48:35

引用回帖:

1楼: Originally posted by hcswj at 2011-10-01 15:03:26:
1、两段互补的引物，是不是一定要反向杂交，即A链5'端到3'端与B链3'端到5'端依次互补才可以？我有一点模糊的印象，以前生物课好像讲过，但是记不清楚了。
2、如何验证两条链是否杂交成功，有什么简单的方法吗？以 ...

1 DNA自身杂交、RNA自身杂交和DNA与RNA的杂交都是反向的。
2 简单的方法里最明确的是电泳，看除了杂交原料之外是否有新的大碱基数的条带产生。更简单的是做紫外吸收，杂交发生后紫外吸收会下降，但不明确。