| 查看: 1987 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
[求助]
SRAP分子标记跑不出好的条带
|
|||
现在在做SRAP，为什么电泳出的条带那么少而且有几对引物之前还可以勉强扩增出条带在做就死活扩不出了，怀疑是引物的问题但引物也换过了，我用的PCR体系（共10μL体系）：10Xbuffer(含镁离子）2.0μL、dntp(10mM)0.5μL、引物（10μM/L)0.5μL、酶（5U/μL)0.2μL。8%聚丙烯酰胺凝胶电泳…… |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有60人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 微量紫外测DNA OD260\OD280的比值
已经有8人回复
- 公司返回的双向测通的序列个人如何拼接啊？
已经有9人回复
- T7载体的IPTG诱导
已经有10人回复
- 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签
已经有17人回复
- 为何PCR产物测序只测一部分？
已经有9人回复
- KH550和KH570哪个更适合用于玻纤增强PET树脂？
已经有8人回复
- RT-PCR跑出来的条带没有量效关系怎么办？什么原因
已经有3人回复
- SRAP标记，制胶有点小疑问。。。求解
已经有7人回复
- 细菌RNA提取后跑电泳出现一条暗带和在泳道中弥散都是什么原因？
已经有9人回复
- ssr标记与srap标记可以用同一种酶吗？
已经有22人回复
- 做SRAP标记的进来，DNA聚丙烯酰胺电泳，预电泳问题。。。
已经有22人回复
- SRAP-PCR 正交优化的胶，怎么统计条带？迷茫ing。。。
已经有6人回复
- SSR分子标记读带方法及使用何种软件进行遗传图谱构建较合适
已经有2人回复
- SRAP分子标记是一对引物对应23个样品，还是一个样品对应23对引物？
已经有15人回复
- 【求助/交流】变性聚丙烯酰胺SRAP凝胶电泳
已经有8人回复
- 【求助/交流】蛋白跑还原电泳是一条带，但是跑非还原电泳三四条带，怎么使他产生单一�
已经有7人回复
wanhscn
木虫 (职业作家)
哲学@草根
- MolEPI: 26
- 应助: 53 (初中生)
- 贵宾: 0.87
- 金币: 3895.7
- 散金: 877
- 红花: 27
- 沙发: 14
- 帖子: 3642
- 在线: 526.2小时
- 虫号: 1376762
- 注册: 2011-08-22
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 很在理啊！ 2011-09-30 23:43:06
小屁乖乖(金币+2): 2011-10-12 16:29:13
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 很在理啊！ 2011-09-30 23:43:06
小屁乖乖(金币+2): 2011-10-12 16:29:13
|
1、10ul 的体系用10Xbuffer(含镁离子）2.0μL，什么意思？为什么用2ul而不用1ul。没有Buffer和镁离子分开的试剂？ 2、10ul体系，体系小，不稳定，建议20ul体系！ 3、泳道上面全是黑的，模板有降解！ 4、SRAP是RAPD的变种，稳定性稍微强于RAPD，但也没有强到那里去，一定程度的不稳定仍然存在。 5、开始扩增时遇到有差异的条带，可以挖出来稀释再P一次，连到载体上两端测序，后根据测序结果多加几个核苷酸设计引物，将其转化为稳定的标记。 |
2楼2011-09-30 22:04:14
3楼2011-10-19 15:20:32
zqt123_1981
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1896.9
- 散金: 1035
- 红花: 1
- 帖子: 276
- 在线: 180.9小时
- 虫号: 164319
- 注册: 2006-01-12
- 性别: GG
- 专业: 果树学
4楼2011-10-19 16:30:40
bluysky0902
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1321
- 红花: 1
- 帖子: 521
- 在线: 93小时
- 虫号: 294845
- 注册: 2006-11-11
- 性别: GG
- 专业: 果树学
5楼2011-10-19 17:25:01
6楼2011-10-20 19:03:45
7楼2011-12-02 08:08:52
8楼2012-10-26 10:50:54
10