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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 这是我的page胶的图，有些奇怪，请大家给点意见，分析下，怎么会跑成这样
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新虫 (小有名气)

[求助] 这是我的page胶的图，有些奇怪，请大家给点意见，分析下，怎么会跑成这样

这是我的page胶的图，12%分离胶，5%浓缩胶，有些奇怪，请大家给点意见，分析下，怎么会跑成这样
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1楼 2011-09-28 22:13:06
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
跑胶的问题，弥散的蛋白质即使染色再好也是弥散，样品中根本看不出任何蛋白质条带，Ladder也弥散了。


我最近也为这事苦恼
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
7楼2011-09-29 17:20:49
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
8楼: Originally posted by 2011加油 at 2012-02-26 15:46:07:
7楼你好。我查看了一些关于WB在跑电泳时，条带产生弥散的问题，答案各异。

现在我的蛋白样品跑浓缩胶时，还是能压成较好的条带，一旦它们跑入分离胶

后，就开始弥散，前后拉开宽度估计有1.5厘米，不知道实 ...

10厘米不到的分离胶，你的溴酚兰能拉开成1.5厘米，实在是太夸张了，我没见过。我的能拉开到0.5厘米不到，但是蛋白质条带很好，说明应该是溴酚兰的问题。溴酚兰拉得很开不一定蛋白质条带就弥散，我曾经试过蛋白质条带弥散但溴酚兰却能压成一条线看起来很好的，从那以后我把做胶和跑胶缓冲液换了，存放在4度，就很好了。你不妨试着换试剂。
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9楼2012-02-26 21:09:28
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
10楼: Originally posted by 2011加油 at 2012-02-27 15:01:42:
我用的样品是去年年底的，放在负20度保存，用过两次，过年回来再用，这也有可能放久了。另外，我发现溴酚蓝有点稠，溶解得不是很好，稍微混匀加入了样品。前后拉宽太远确实分不清，到底是样品问题还是溴酚蓝问题 ...

上样缓冲液加了SDS和DTT，不会粘稠的，不知道你的为什么粘稠了。
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11楼2012-02-27 23:03:00
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