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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC重复性不好是什么原因呢
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settleryy

金虫 (小有名气)

[交流] HPLC重复性不好是什么原因呢

最近做了个实验，同一个样品配置成1mg/ml，2mg/ml，4mg/ml和10mg/ml四个不同浓度，跑完柱子，用面积归一法计算其中一个组分的相对百分含量，结果四个浓度出来的结果都不一样，相差比较大。这是为什么呢！
同一个样品，即使浓度不一样，但是其内部组分相对含量应该一样的吧，有点搞不懂。想请教请教~~
另外同一个样品连续进样几次，发现结果也有不小差距，重复性不好，是怎么回事呢~~
谢谢~~
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1楼 2011-09-27 13:54:53
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by settleryy at 2011-09-27 20:58:54:
漏液倒没有，不知道和进样量有无关系，用的200ul的定量环

你的针插到底没？有没有一种突破感？
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11楼2011-09-27 21:22:15
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xql0518

银虫 (小有名气)
★
settleryy(金币+1):谢谢参与
“同一个样品，即使浓度不一样，但是其内部组分相对含量应该一样的吧” 楼主这句话话非也，本身这句话是没什么问题，但是你样品浓度低，使得你样品中杂质相对于仪器来说响应很低或者说是检不出，而且你用的面积归一法，出现这种情况，主含量往往偏高，当你样品浓度变高，有些在低浓度情况下检不出来或者响应很低的物质，也随着样品主含量增加而增加从而被仪器检测出来了，这样自然而来用面积归一法测定的话样品主含量会降低。
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2楼2011-09-27 14:09:49
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xql0518

银虫 (小有名气)
你说的样品重复性差原因很多，样品可能在柱中残留比较严重，进样过程是否有气泡产生，柱子是否平衡好，另外楼主说的重复性不是很好，那样品重复性RSD是多少呢？
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3楼2011-09-27 14:23:48
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settleryy

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xql0518 at 2011-09-27 14:09:49:
“同一个样品，即使浓度不一样，但是其内部组分相对含量应该一样的吧” 楼主这句话话非也，本身这句话是没什么问题，但是你样品浓度低，使得你样品中杂质相对于仪器来说响应很低或者说是检不出，而且你用的面积归 ...

恩，是有这种情况，但是不知道为什么我的是1mg/ml浓度，结果9.6%；2mg/ml为7.8%；4mg/ml为5.6%；而10mg/ml为6.1%。好像没有什么规律~~
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4楼2011-09-27 14:24:55
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