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[交流]
细胞融合的具体操作过程及其注意事项
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| 和做过细胞融合的各位虫友,交流一下细胞融合的操作过程奇迹注意事项,希望可以提高融合成功的可能性。我做过好多次融合了,但是最后都没有得到能稳定分泌特异性好的抗体的细胞株,有一次扩到大瓶培养时,竞争性还很好,但是长满全瓶时,竞争性就完全没有了,应该是特异性细胞生长性不好被挤掉死亡了。怎么做才能提高融合效率呢,谢谢各位! |
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8楼2011-09-20 13:21:36
★
shiliushu44(金币+1):谢谢参与
shiliushu44(金币+1):谢谢参与
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本帖内容被屏蔽 |
3楼2011-09-19 11:06:13
4楼2011-09-19 21:26:31
★ ★
shiliushu44(金币+1):谢谢参与
shiliushu44(金币+5): 2011-09-20 14:50:27
xuanzhang(金币+1): 谢谢参与交流 2011-09-28 15:08:10
shiliushu44(金币+1):谢谢参与
shiliushu44(金币+5): 2011-09-20 14:50:27
xuanzhang(金币+1): 谢谢参与交流 2011-09-28 15:08:10
| 有一次扩到大瓶培养时,竞争性还很好,这个时候证明你那细胞还有分泌针对免疫原的抗体,但是最后没有了,什么细胞之间竞争抑制死亡了。所以在竞争性还很好的时候证明你那细胞是多克隆细胞,你要进行有限稀释,你首先吹大孔里细胞,然后记数100个左右的细胞,平均铺到96孔细胞培养板中,长个7天左右,然后在显微镜下观察,如果是单克隆,就只有一团细胞,如果多克隆就不只一团细胞,elisa检测阳性的,挑选单克隆进行扩大培养,就ok。 |
7楼2011-09-20 13:20:49













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