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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PET32a的组氨酸标签和我的蛋白加起来应该多大呀？
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lxjwishes

银虫 (正式写手)

[求助] PET32a的组氨酸标签和我的蛋白加起来应该多大呀？

刚涉入蛋白试验
做一个原核表达的实验
我的阅读框516bp
编码171aa
使用的载体为PET32a
构建载体时没有去除TAG
就是说插入的是整个阅读框
用的酶切位点为Hind III 和BamH I
不知道该怎么计算表达出来的大小

[ Last edited by lxjwishes on 2011-9-13 at 16:28 ]
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pleasemywings,flymeaway.
1楼 2011-09-13 16:11:04
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
lxjwishes(金币+5): 空载体表达出来的那个条带好像有20多kD，大小不是简单的相加啊，我写论文的时候应该怎么描述呢 2011-09-13 16:45:08
dhd997(金币+2): good 2011-09-13 18:10:58
从Trx-tag的第一个氨基酸到BamH I位点对应氨基酸，再加上你的编码氨基酸，初步算了下332个左右，约35KD。
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2楼2011-09-13 16:36:23
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aayqaa

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
lxjwishes(金币+3): 多谢指教 2011-09-13 17:02:09
dhd997(金币+2): good 2011-09-13 18:11:07
把你的氨基酸序列和跟你的蛋白连在一起的标签部分的序列粘贴到Bioedit软件里，在那里可以显示出来相关的信息
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3楼2011-09-13 16:49:20
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lxjwishes

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-09-13 16:36:23:
从Trx-tag的第一个氨基酸到BamH I位点对应氨基酸，再加上你的编码氨基酸，初步算了下332个左右，约35KD。

空载体表达出来的那条21kD的带是从哪里到哪里
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pleasemywings,flymeaway.
4楼2011-09-13 16:58:31
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-14 07:32:53
lxjwishes(金币+1): 多谢 2011-09-15 15:45:22
并不是简单的相加，跟酶切位点有关的。空载体的表达是从rbs后面第一个ATG一直到终止密码子为止的。
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5楼2011-09-13 21:10:27
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cyzhgt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-09-14 14:29:42
lxjwishes(金币+1): 好像懂了，谢谢 2011-09-15 15:45:33
把整段序列（从起始密码子到终止密码子）粘帖到软件上分析即可，我习惯用DNAMAN。或者在线也行，这些网站很多。http://web.expasy.org/compute_pi/
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6楼2011-09-14 12:03:00
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