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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何参照maker的亮度估算其它DNA的浓度？
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419249049

木虫 (正式写手)

[求助] 如何参照maker的亮度估算其它DNA的浓度？

如题，各位达人赶来发表一下意见吧
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1楼 2011-09-08 16:36:37
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cdl007

木虫 (正式写手)
nanophotometer,,俺一直梦想有一台。。
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5楼2011-09-10 06:37:10
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sp515

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
419249049(金币+5): 谢谢你的参与 2011-09-09 13:50:10
dhd997(金币+2): good 2011-09-10 07:47:10
对照Marker的浓度，用软件处理，离你跑的片段，和最接近的Marker带，最后会出现一个比值，然后你算一下就可以了。
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2楼2011-09-09 08:30:34
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hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
419249049(金币+5): 谢谢你的参与 2011-09-09 13:50:20
dhd997(金币+2): good 2011-09-10 07:47:20
marker的说明书里面都有加几微升的DNA 对应的量，剩下的和楼上差不多呵呵，那个软件我们以前做半定量的时候一直在用
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一切开始于结束之后
3楼2011-09-09 09:04:26
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): good 2011-09-10 00:12:47
直接肉眼观察条带亮度，跟Maker比较就可以了。Maker一般有50ng和100ng两个量的条带（具体参照说明书），多加练习是可以估计出条带亮度的。我们实验室就是这么做的，很多情况下都是肉眼估计浓度：PCR产物浓度、质粒浓度、连接时估计载体和插入片段的浓度，等等。我们也有很好的分光光度计（NanoPhotometer），但是普通实验，大家还是喜欢直接肉眼估计。现在我们大部分人都估计得很准，往往跑了胶，估了浓度，再拿分光光度计测，结果差不多
这个真没什么好说的，就是两个字：经验。做得多了，就估得准啦。
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419249049
4楼2011-09-09 21:24:41
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