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419249049

木虫 (正式写手)

[求助] 如何参照maker的亮度估算其它DNA的浓度?

如题,各位达人赶来发表一下意见吧
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sp515

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
419249049(金币+5): 谢谢你的参与 2011-09-09 13:50:10
dhd997(金币+2): good 2011-09-10 07:47:10
对照Marker的浓度,用软件处理,离你跑的片段,和最接近的Marker带,最后会出现一个比值,然后你算一下就可以了。
2楼2011-09-09 08:30:34
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hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
419249049(金币+5): 谢谢你的参与 2011-09-09 13:50:20
dhd997(金币+2): good 2011-09-10 07:47:20
marker的说明书里面都有加几微升的DNA 对应的量,剩下的和楼上差不多呵呵,那个软件我们以前做半定量的时候一直在用
一切开始于结束之后
3楼2011-09-09 09:04:26
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): good 2011-09-10 00:12:47
直接肉眼观察条带亮度,跟Maker比较就可以了。Maker一般有50ng和100ng两个量的条带(具体参照说明书),多加练习是可以估计出条带亮度的。我们实验室就是这么做的,很多情况下都是肉眼估计浓度:PCR产物浓度、质粒浓度、连接时估计载体和插入片段的浓度,等等。我们也有很好的分光光度计(NanoPhotometer),但是普通实验,大家还是喜欢直接肉眼估计。现在我们大部分人都估计得很准,往往跑了胶,估了浓度,再拿分光光度计测,结果差不多
这个真没什么好说的,就是两个字:经验。做得多了,就估得准啦。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2011-09-09 21:24:41
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cdl007

木虫 (正式写手)

nanophotometer,,俺一直梦想有一台。。
5楼2011-09-10 06:37:10
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419249049

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-09-09 21:24:41:
直接肉眼观察条带亮度,跟Maker比较就可以了。Maker一般有50ng和100ng两个量的条带(具体参照说明书),多加练习是可以估计出条带亮度的。我们实验室就是这么做的,很多情况下都是肉眼估计浓度:PCR产物浓度、质粒 ...

多谢你的帖子,没办法加金币了,只好送你红花了,多谢!
6楼2011-09-10 21:18:10
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xt123xt

银虫 (小有名气)

从来不估 直接测
7楼2011-09-11 10:22:24
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xiaoche

铜虫 (小有名气)

用onedrop测啊。挺好用 。
8楼2011-09-16 17:08:07
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qxt97

铜虫 (初入文坛)

待测样品稀释几个浓度梯度,然后与marker对比,肉眼观察定量。其结果还是比较准的。
9楼2012-02-11 05:16:13
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kaka100

新虫 (初入文坛)

nanajob 结果也不错!
10楼2012-02-11 11:30:42
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