应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切的时候，条带成糊状，一片。
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2429  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

[求助] 酶切的时候，条带成糊状，一片。

用fermentas的酶 进行酶切，条带成糊状，一片。小试如此，大切也是如此。
原来质粒是pET-28a的，7700bp，酶切后，HInd3，Xba1，Nde1，Sca1（单酶切位点）酶都用过，条带跑到了几百bp的位置，和未酶切的一起电泳的对比（没有存图）相距很远。如果是大切的话，就是一段糊状的条带。请问是什么原因？
酶污染了DNA酶了？还是怎么？

[ Last edited by sayfxxk2u on 2011-9-2 at 22:08 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-02 22:07:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sayfxxk2u

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liukgg at 2011-09-02 23:47:54:
如果用了多种酶切后结果还是这样的话，酶污染的可能性不是太大，如果不放心可以换支新的酶试一下。再就是对质粒进行一下鉴定，确保是你要的质粒，根据图谱找上几个多酶切位点切一下就行。然后就是调整一下酶切条件 ...

我没有减少上样量，就是减少了下时间。。就没有糊。酶量也减少。
赞一下 回复此楼
6楼2011-09-05 13:34:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

liukgg

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 最近很活跃啊 2011-09-03 07:44:49
sayfxxk2u(金币+1): 谢谢 2011-09-05 13:34:01
sayfxxk2u(金币+4): 2011-09-05 19:43:12
如果用了多种酶切后结果还是这样的话，酶污染的可能性不是太大，如果不放心可以换支新的酶试一下。再就是对质粒进行一下鉴定，确保是你要的质粒，根据图谱找上几个多酶切位点切一下就行。然后就是调整一下酶切条件及电泳条件，大切模糊的话可能和上样量有关，建议缩小一下上样量看看
赞一下(1人) 回复此楼
山水凤凰
2楼2011-09-02 23:47:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yguang

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-03 07:44:58
sayfxxk2u(金币+1): 谢谢 2011-09-05 13:35:14
sayfxxk2u(金币+4): 2011-09-05 19:43:06
如果确定质粒本身没问题，酶也没问题的话，减少酶量缩短酶切时间试试！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-09-03 00:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半导体与导体

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

考虑酶的星号活性
赞一下 回复此楼
4楼2011-09-03 08:16:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 各位老师好，我的一志愿为北京科技大学085601材料专硕 +5 Koxui 2026-03-28 5/250 2026-03-28 22:08 by 运气yunqi
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 305求调剂 +6 RuiFairyrui 2026-03-28 6/300 2026-03-28 21:26 by sanrepian
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +3 Shern—- 2026-03-28 3/150 2026-03-28 21:24 by 唐沐儿
[考研] 343求调剂 +5 爱羁绊 2026-03-28 5/250 2026-03-28 20:53 by 唐沐儿
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 329求调剂 +6 星野? 2026-03-26 6/300 2026-03-28 14:14 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +4 冬十三 2026-03-24 4/200 2026-03-28 13:17 by 唐沐儿
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +15 荷包蛋hyj 2026-03-26 15/750 2026-03-28 04:13 by fmesaito
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 求调剂 +3 刘柯@ 2026-03-24 4/200 2026-03-27 11:28 by shangxh
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 招收生物学/细胞生物学调剂 +3 IceGuo 2026-03-26 4/200 2026-03-27 05:35 by user003
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭