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love_st

金虫 (著名写手)


[求助] UNG酶之----dUTP和dTTP间的比例

dUTP和dTTP之间比例在多少范围内,UNG酶可以把产物给降解掉?有用过或者做过的请吱声啊!
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
love_st: 金币+5, 好久的帖子谢谢 2012-05-10 09:17:57
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-10 13:54:58
嗯.......................
       使用UDG系统来抗Carryover污染的吗 应用于qPCR吗 我记得是说用dUTP代替dTTP应用于PCR过程的 好像没有说是用混合的.......应用UDG系统好像很麻烦,必须全部使用dUTP才有效果,单单在一个反应使用是没有用的........
       个人看法 若有说错请高手指点
Let God do with it as He wills
2楼2012-05-09 23:32:39
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love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
4561818楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-09 23:32:39:
嗯.......................
       使用UDG系统来抗Carryover污染的吗 应用于qPCR吗 我记得是说用dUTP代替dTTP应用于PCR过程的 好像没有说是用混合的.......应用UDG系统好像很麻烦,必须全部使用dUTP才有效果,单 ...

其实当时问这个问题的时候是有原因的,我在优化体系的时候将dTTP换成dUTP后,结果差了很多,所以有这个问题,现在也基本上解决了
3楼2012-05-10 09:17:25
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

引用回帖:
4562008楼: Originally posted by love_st at 2012-05-10 09:17:25:
其实当时问这个问题的时候是有原因的,我在优化体系的时候将dTTP换成dUTP后,结果差了很多,所以有这个问题,现在也基本上解决了

出现了什么问题 具体是怎么解决的呢
偶很感兴趣 能麻烦赐教吗
Let God do with it as He wills
4楼2012-05-10 10:40:13
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love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
4562125楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-10 10:40:13:
出现了什么问题 具体是怎么解决的呢
偶很感兴趣 能麻烦赐教吗

在做多重realtimePCR时候,dTTP扩增曲线非常好,换成dUTP后,里面的某一个就变的很难看,后来换了个系统就好了
5楼2012-05-10 11:59:40
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thh2008

铜虫 (初入文坛)

偶也很感兴趣呢。。。。最近也在做多重realtinme PCR,请问楼主“换了个系统就好了”具体怎么回事呢?
6楼2012-06-07 15:10:43
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love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
4595848楼: Originally posted by thh2008 at 2012-06-07 15:10:43
偶也很感兴趣呢。。。。最近也在做多重realtinme PCR,请问楼主“换了个系统就好了”具体怎么回事呢?

就是把reaction buffer换了,后来有改善
7楼2012-06-07 15:49:59
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thh2008

铜虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
偶也很感兴趣呢。。。。最近也在做多重realtime PCR,请问楼主“换了个系统就好了”具体怎么回事呢?
8楼2012-06-07 15:50:18
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thh2008

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4595929楼: Originally posted by love_st at 2012-06-07 15:49:59
就是把reaction buffer换了,后来有改善...

还想请教一下,把dTTP换成dUTP后另加UDG酶做多重RT-PCR效果会更好吗?
9楼2012-06-07 15:56:06
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ghs00

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by love_st at 2012-05-10 09:17:25
其实当时问这个问题的时候是有原因的,我在优化体系的时候将dTTP换成dUTP后,结果差了很多,所以有这个问题,现在也基本上解决了...

楼主,我也遇到这个问题了,能麻烦告知解决办法吗?谢谢
10楼2013-06-27 12:24:54
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