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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » UNG酶之----dUTP和dTTP间的比例
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love_st

金虫 (著名写手)

[求助] UNG酶之----dUTP和dTTP间的比例

dUTP和dTTP之间比例在多少范围内，UNG酶可以把产物给降解掉？有用过或者做过的请吱声啊！
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thh2008

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1楼 2011-09-02 10:53:50
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
love_st: 金币+5, 好久的帖子谢谢 2012-05-10 09:17:57
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-05-10 13:54:58
嗯.......................
       使用UDG系统来抗Carryover污染的吗 应用于qPCR吗 我记得是说用dUTP代替dTTP应用于PCR过程的 好像没有说是用混合的.......应用UDG系统好像很麻烦，必须全部使用dUTP才有效果，单单在一个反应使用是没有用的........
       个人看法 若有说错请高手指点
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Let God do with it as He wills
2楼2012-05-09 23:32:39
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love_st

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4561818楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-09 23:32:39:
嗯.......................
       使用UDG系统来抗Carryover污染的吗 应用于qPCR吗 我记得是说用dUTP代替dTTP应用于PCR过程的 好像没有说是用混合的.......应用UDG系统好像很麻烦，必须全部使用dUTP才有效果，单 ...

其实当时问这个问题的时候是有原因的，我在优化体系的时候将dTTP换成dUTP后，结果差了很多，所以有这个问题，现在也基本上解决了
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3楼2012-05-10 09:17:25
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
引用回帖:
4562008楼: Originally posted by love_st at 2012-05-10 09:17:25:
其实当时问这个问题的时候是有原因的，我在优化体系的时候将dTTP换成dUTP后，结果差了很多，所以有这个问题，现在也基本上解决了

出现了什么问题 具体是怎么解决的呢
偶很感兴趣 能麻烦赐教吗
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Let God do with it as He wills
4楼2012-05-10 10:40:13
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love_st

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4562125楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-05-10 10:40:13:
出现了什么问题 具体是怎么解决的呢
偶很感兴趣 能麻烦赐教吗

在做多重realtimePCR时候，dTTP扩增曲线非常好，换成dUTP后，里面的某一个就变的很难看，后来换了个系统就好了
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5楼2012-05-10 11:59:40
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thh2008

铜虫 (初入文坛)
偶也很感兴趣呢。。。。最近也在做多重realtinme PCR，请问楼主“换了个系统就好了”具体怎么回事呢？
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6楼2012-06-07 15:10:43
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love_st

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4595848楼: Originally posted by thh2008 at 2012-06-07 15:10:43
偶也很感兴趣呢。。。。最近也在做多重realtinme PCR，请问楼主“换了个系统就好了”具体怎么回事呢？

就是把reaction buffer换了，后来有改善
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7楼2012-06-07 15:49:59
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thh2008

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
偶也很感兴趣呢。。。。最近也在做多重realtime PCR，请问楼主“换了个系统就好了”具体怎么回事呢？
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8楼2012-06-07 15:50:18
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thh2008

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4595929楼: Originally posted by love_st at 2012-06-07 15:49:59
就是把reaction buffer换了，后来有改善...

还想请教一下，把dTTP换成dUTP后另加UDG酶做多重RT-PCR效果会更好吗？
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9楼2012-06-07 15:56:06
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ghs00

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by love_st at 2012-05-10 09:17:25
其实当时问这个问题的时候是有原因的，我在优化体系的时候将dTTP换成dUTP后，结果差了很多，所以有这个问题，现在也基本上解决了...

楼主，我也遇到这个问题了，能麻烦告知解决办法吗？谢谢
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10楼2013-06-27 12:24:54
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