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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)


[资源] 【资料】宏基因组Fosmid 文库构建

在这里上传个宏基因组Fosmid文库构建的说明书,供大家交流,由于目前构建的几个宏基因组文库库容不是很大,希望构建宏基因组文库的各位高手能提出写宝贵的经验和实验注意事项,谢谢啦·

[ Last edited by silicare on 2012-10-18 at 07:59 ]
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小白的桥段

新虫 (初入文坛)


★★★ 三星级,支持鼓励

感谢楼主的分享。我想问一下,有哪位做过或在做Fosmid克隆文库构建啊,我建了两个不长菌啊,不知道怎么办好啦,求指教。
还有一下疑问,走过的路过的,有知道的麻烦指点下,谢谢:
1.DNA的剪切问题,我的片段大于40Kb,剪切了500次后补平末端,脉冲电泳然后切胶回收。我用的普通Lamda Marker,和试剂盒中带的Fosmid control DNA做对照的。不知道这个普通的Lamda Marker跑脉冲电泳会不会有误差大的问题。
2. 切胶回收后检测DNA浓度为53.8 ng/ul,用DNA定量仪检测的。不知看官们有什么看法。
3. 包装蛋白就按照说明书来加的,没有打进气泡。其他的还需要注意什么。
4. 侵染宿主菌时只把包装产物轻轻加进去,没有太大动作混,不知会不会有影响。其他人是怎么操作的?
以上问题,请有任何看法的筒子们指教,不胜感激~!
24楼2012-11-16 11:02:10
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cexoihtydx

金虫 (正式写手)


★★★★★ 五星级,优秀推荐

支持,师弟加油啊!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2011-09-01 00:22:44
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)


怎么没人讨论下自己的经验啊,我有时候建的长得不到1万或者只有几千,不知道是哪里要特别处理的,希望能和大家交流下
7楼2011-09-01 13:05:05
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jinhx874楼
2011-08-31 18:52   回复  
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lizk19848楼
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liygmail9楼
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heta10110楼
2011-12-04 20:41   回复  
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htpan11楼
2012-02-18 10:02   回复  
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wellwood13楼
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wygao201214楼
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