| 查看: 6361 | 回复: 28 | |||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
xintutiao金虫 (小有名气)
|
[交流]
请教各位前辈 为什么我做菌落PCR总也P不出来 已有15人参与
|
||
| 请教各位前辈 PCR的体系是师姐给的，她说一直都用这个，让我做的时候，我总也P不出来 模板是用小枪尖挑的菌落，然后在体系中蘸几下。 不知道为什么 我总是P不出来，P出来的时候很少很少， 我感觉不出来每次做的有什么差异，但是为什么就是P不出来呢？ 谢谢大家了 |
回复此楼» 猜你喜欢
极限拉扯，如何抉择
已经有15人回复
-
申请科研项目纯靠实力能成功吗？
已经有8人回复
-
中科院海洋所招收海洋材料相关领域博士研究生及研究助理
已经有4人回复
-
40+中年人失业后，还能找到好工作吗？
已经有3人回复
-
二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores
已经有4人回复
-
OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？
已经有13人回复
-
课题组会帮你通过考核么？
已经有7人回复
-
入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍
已经有6人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有9人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有10人回复
wuyuan1992
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 428.3
- 散金: 185
- 红花: 2
- 帖子: 403
- 在线: 277.6小时
- 虫号: 1369725
- 注册: 2011-08-16
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
我的第一感觉有两个原因 一个是菌体量，菌体量太多或者太少都可能导致扩增不出。我之前做16SDNA菌落PCR种属鉴定的时候就用牙签轻轻蘸一下就能P出了，如果菌体量太多的话可能导致扩增不出，道理和http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4765321相似 第二个可能是预变性时间不够，正如楼上所说。因为革兰氏阴性和阳性菌的细胞壁结构不一样，革兰氏阳性细胞壁厚且肽聚糖层交联度高，应该更难破裂。但是如果你师姐之前用的菌和你用的菌是一样的，就可以排除这种可能了。 |
25楼2012-08-12 23:53:08
gwbk
木虫 (正式写手)
- MicEPI: 2
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2293.5
- 红花: 24
- 帖子: 529
- 在线: 186.9小时
- 虫号: 1320681
- 注册: 2011-06-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2011-08-23 23:40:57
redlizi
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3791.7
- 红花: 1
- 帖子: 399
- 在线: 480.2小时
- 虫号: 266906
- 注册: 2006-07-22
- 性别: GG
- 专业: 生物海洋学与海洋生物资源
3楼2011-08-24 08:42:12
wqj1988926
金虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 1222
- 散金: 27
- 红花: 5
- 帖子: 929
- 在线: 225.6小时
- 虫号: 1156883
- 注册: 2010-11-27
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2011-08-24 08:45:45
200