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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR结果白花花的一片，肿么办啊？
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oranzxc

金虫 (初入文坛)

[交流] PCR结果白花花的一片，肿么办啊？ 已有6人参与

玉米DNA
PCR以后跑的电泳
琼脂糖浓度1
电压120
跑了40分钟
总是有这种白花花的东西
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1楼 2011-08-17 16:35:52
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青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

★ ★
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西瓜(金币+1): 鼓励 2011-08-17 18:50:40
是不是电泳液该换了啊？还有制胶的TAE应该也不行了，你先换一下试试吧~
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生命即这般无尽变数，辗转来去皆苛求不得
2楼2011-08-17 17:04:34
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w2boluo

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+3): Good 2011-08-17 18:50:50
比较典型的pcr崩溃现象，减酶，减模板，减镁离子，减循环数，提高退火温度。
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How about the future？
3楼2011-08-17 18:23:59
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3, MolEPI+1): good 2011-08-18 17:59:21
首先可以告诉楼主的是：PCR没有P出任何结果，或许你的样品不太对。。。

至于问题呢：
1：你的样品有问题，所以不能扩增出目的片段；
2：PCR体系不太合理，引物或者模板太多了；
3：程序设置的不太合理，例如延伸时间和退火温度等等。。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-08-17 20:49:32
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绒绒兔的天堂

银虫 (小有名气)
★
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也经常出现同楼主的问题相同的体系和程序，有时就是P不出来，很可能是模板问题。
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5楼2011-08-17 21:02:03
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绒绒兔的天堂

银虫 (小有名气)
才看出是你啊，我说怎么这么熟悉的图片呢，
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6楼2011-08-17 21:03:47
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wzqno

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3, MolEPI+1): good 2011-08-18 17:59:38
你这PCR的特异性太差了，调整一下PCR体系，和PCR程序
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7楼2011-08-18 09:22:10
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oranzxc

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by w2boluo at 2011-08-17 18:23:59:
比较典型的pcr崩溃现象，减酶，减模板，减镁离子，减循环数，提高退火温度。

正在摸索，希望会越来越好
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8楼2011-08-18 10:44:25
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oranzxc

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-17 20:49:32:
首先可以告诉楼主的是：PCR没有P出任何结果，或许你的样品不太对。。。

至于问题呢：
1：你的样品有问题，所以不能扩增出目的片段；
2：PCR体系不太合理，引物或者模板太多了；
3：程序设置的不太合理，例如 ...

各种东西都在调整，新实验室，不是很适应啊
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9楼2011-08-18 10:45:17
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oranzxc

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wzqno at 2011-08-18 09:22:10:
你这PCR的特异性太差了，调整一下PCR体系，和PCR程序

谢啦，，，，
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10楼2011-08-18 10:45:33
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