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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 淋巴细胞分离
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xiaoxiaorui

新虫 (初入文坛)

[求助] 淋巴细胞分离

淋巴分离的需要的材料 方法和注意事项，吸取的淋巴细胞应该放到什么样的管里保存，吸取用移液枪可以吗？如果取血液后先-80保存 再解冻分离淋巴细胞有影响吗？本人以前从没做过，写的详细些，谢谢，
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1楼 2011-08-17 15:59:33
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julietguo

银虫 (正式写手)
引用回帖:
414159楼: Originally posted by wind20020108 at 2011-08-22 22:58:18:
需要注意的是吸取到淋巴细胞后要低速度离心一次，大约200xg离心15分钟，以去除血小板，可以用移液器吸取，不要在-80冻，要不然所有细胞都会破裂的。

请问这个低速离心之后，血小板在上清吗
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6楼2012-05-10 11:12:34
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笑霸

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-18 17:57:23
用淋巴细胞分层液（内会附说明的），吸细胞可用移液枪。自己没听说也没试过过有把血液-80保存再分离的，感觉应该会有影响
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2楼2011-08-17 21:02:44
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-18 17:57:31
xiaoxiaorui(金币+2): 2011-09-03 08:37:04
你用的是Ficoll法分离单个核细胞吗？这方法需要温度在18-23℃之间，分离的淋巴细胞没什么特殊的保存方法，一般搁PBS或培养液中就行，不过血液在-80冻过之后红细胞会裂解的，可能会影响吧，这个还没试过
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3楼2011-08-18 09:18:27
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wind20020108

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-23 07:59:57
需要注意的是吸取到淋巴细胞后要低速度离心一次，大约200xg离心15分钟，以去除血小板，可以用移液器吸取，不要在-80冻，要不然所有细胞都会破裂的。
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不知道能说啥
4楼2011-08-22 22:58:18
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