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wanghd2826铁虫 (小有名气)
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[求助]
关于RNA电泳~~~请高手指点
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| RNA电泳分变性和非变性的两种，但是不知道在何种情况下运用呢，我查了一些资料说变性的可以按分子量将RNA分开，貌似是比较精确的做法。我提取的是昆虫的腹部总RNA，检测完整度和纯度的话，是用非变性的还是用变性的呢？请高指点啊，搜索了下没有很明确的答案。 |
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 【分子生物】EPI帖 |
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西瓜
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4楼2011-08-17 15:07:21
西瓜
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【答案】应助回帖
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amisking(金币+2, MolEPI+1): 鼓励应助 2011-08-17 20:18:52
amisking(金币+2, MolEPI+1): 鼓励应助 2011-08-17 20:18:52
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光看这个的话非变性就可以了。就用普通的DNA琼脂糖凝胶电泳的那套东东，100V，15分钟就差不多了。 如果混有基因组DNA，会在靠近加样孔的地方看到模糊条带；完整度的话，主要看5s和18s（不知昆虫是多少S  ）两条亮带，如果别降解了会看到拖尾。不过RNA各种大小都有，所以看到整个泳道模糊的一片是正常的，这个要跟拖尾现象区分开来哦。还有，虽然跟DNA电泳的东西一样，但是最好弄一套跑RNA电泳专用的。实在没有的话，跑RNA之前，把电泳槽的缓冲液换成新的，也OK。 |
2楼2011-08-17 13:07:01
wanghd2826
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3楼2011-08-17 14:53:48
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