提RNA的时候怎么才能避免ＤＮＡ污染呢？ - 分子生物 - 综合其他

11楼2011-09-19 12:38:21

yzuxhq368

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1001.1
散金: 175
红花: 7
帖子: 129
在线: 64.3小时
虫号: 448251
注册: 2007-11-01

测一下DNA的量，DNA酶处理DNA的量是有一定限度，摸索一下你酶能处理的DNA的量

12楼2011-09-19 22:18:14

小鸟剑客

金虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 2 (幼儿园)
金币: 1519.9
散金: 16
红花: 1
帖子: 224
在线: 50.8小时
虫号: 1257858
注册: 2011-04-07
性别: GG
专业: 神经生物学

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): 鼓励交流 2011-09-20 11:17:46
wanhscn: GOOD！ 2011-09-20 11:18:08

试试用TRIZOL试剂看，应该不会有DNA。上次我用TRIZOL和TRANZOL比较了下，结果TRANZOL有明显DNA，TRIZOL没有

赞一下(2人)

13楼2011-09-20 09:51:44

bolomeer

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 91.7
散金: 21
红花: 1
帖子: 56
在线: 12.5小时
虫号: 1408640
注册: 2011-09-20

你是怎么提取的，能不能把你的具体参数告诉我们，以便发现问题。

14楼2011-09-20 10:11:10

临风7071

木虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 7 (幼儿园)
金币: 2167.6
散金: 79
红花: 7
帖子: 617
在线: 553.9小时
虫号: 555997
注册: 2008-05-10
性别: GG
专业: 植物生殖生物学

酚/氯仿抽提的时候，上清少吸，勿碰到中间层

15楼2011-09-20 11:28:28

clare420

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 593.8
红花: 1
帖子: 93
在线: 60.4小时
虫号: 964923
注册: 2010-03-08
专业: 生物化学

异丙醇沉淀的时候加1/10体积的醋酸钠（ph4.2）

16楼2011-09-20 11:47:21

倔强的投手

新虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 5 (幼儿园)
金币: 953.9
散金: 50
红花: 1
帖子: 185
在线: 39.7小时
虫号: 1210386
注册: 2011-02-23
专业: 畜牧学

你提取的RNA是用于做什么的？
如果就是做PCR的，在设计引物的时候
可能跨内含子，这样即使有DNA污染也没关系的

17楼2011-09-20 13:37:43

DXY1

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 4.5
帖子: 50
在线: 17小时
虫号: 1361580
注册: 2011-08-05
性别: GG
专业: 动物遗传学

用TRIZOL提看不见DNA条带，但也许会有少许的DNA或者蛋白质会混在里面，如果想将RNA的质量再提高的话，可以再用个纯化试剂盒进行纯化

18楼2011-09-20 13:37:43

坏坏zjf

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6.9
散金: 1
红花: 1
帖子: 11
在线: 3.3小时
虫号: 949996
注册: 2010-01-28
专业: 植物生理与生化

引用回帖:

10楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2011-09-19 08:56:33
看你后续的实验目的，有些实验是不用取出DNA的，用DNA酶处理有可能把RNA也降解掉了。

我现在也遇到了这样的问题，请问，我后面要做RT-PCR，而且我引物设计是跨了内含子的，这样的话，对荧光定量有没有影响啊？非常感谢哦！

19楼2014-09-15 09:41:49