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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 怎么都行 at 2011-08-17 08:51:11:
这个方法我们也试过,DNA还是去不干净,并且折腾完后RNA也降解不少

我做的DNA是除去了,不过RNA损失确实比较大
11楼2011-09-19 12:38:21
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yzuxhq368

金虫 (小有名气)

测一下DNA的量,DNA酶处理DNA的量是有一定限度,摸索一下你酶能处理的DNA的量
12楼2011-09-19 22:18:14
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): 鼓励交流 2011-09-20 11:17:46
wanhscn: GOOD! 2011-09-20 11:18:08
试试用TRIZOL试剂看,应该不会有DNA。上次我用TRIZOL和TRANZOL比较了下,结果TRANZOL有明显DNA,TRIZOL没有
13楼2011-09-20 09:51:44
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bolomeer

铜虫 (小有名气)

你是怎么提取的,能不能把你的具体参数告诉我们,以便发现问题。
14楼2011-09-20 10:11:10
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临风7071

木虫 (正式写手)

酚/氯仿抽提的时候,上清少吸,勿碰到中间层
15楼2011-09-20 11:28:28
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clare420

新虫 (小有名气)

异丙醇沉淀的时候加1/10体积的醋酸钠(ph4.2)
16楼2011-09-20 11:47:21
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倔强的投手

新虫 (小有名气)

你提取的RNA是用于做什么的?
如果就是做PCR的,在设计引物的时候
可能跨内含子,这样即使有DNA污染也没关系的
17楼2011-09-20 13:37:43
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DXY1

新虫 (初入文坛)

用TRIZOL提看不见DNA条带,但也许会有少许的DNA或者蛋白质会混在里面,如果想将RNA的质量再提高的话,可以再用个纯化试剂盒进行纯化
18楼2011-09-20 13:37:43
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坏坏zjf

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2011-09-19 08:56:33
看你后续的实验目的,有些实验是不用取出DNA的,用DNA酶处理有可能把RNA也降解掉了。

我现在也遇到了这样的问题,请问,我后面要做RT-PCR,而且我引物设计是跨了内含子的,这样的话,对荧光定量有没有影响啊?非常感谢哦!
19楼2014-09-15 09:41:49
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