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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提RNA的时候怎么才能避免ＤＮＡ污染呢？
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 怎么都行 at 2011-08-17 08:51:11:
这个方法我们也试过，DNA还是去不干净，并且折腾完后RNA也降解不少

我做的DNA是除去了，不过RNA损失确实比较大
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11楼2011-09-19 12:38:21
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yzuxhq368

金虫 (小有名气)
测一下DNA的量，DNA酶处理DNA的量是有一定限度，摸索一下你酶能处理的DNA的量
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12楼2011-09-19 22:18:14
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): 鼓励交流 2011-09-20 11:17:46
wanhscn: GOOD！ 2011-09-20 11:18:08
试试用TRIZOL试剂看，应该不会有DNA。上次我用TRIZOL和TRANZOL比较了下，结果TRANZOL有明显DNA，TRIZOL没有
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13楼2011-09-20 09:51:44
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bolomeer

铜虫 (小有名气)
你是怎么提取的，能不能把你的具体参数告诉我们，以便发现问题。
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14楼2011-09-20 10:11:10
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临风7071

木虫 (正式写手)
酚/氯仿抽提的时候，上清少吸，勿碰到中间层
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15楼2011-09-20 11:28:28
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clare420

新虫 (小有名气)
异丙醇沉淀的时候加1/10体积的醋酸钠（ph4.2）
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16楼2011-09-20 11:47:21
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倔强的投手

新虫 (小有名气)
你提取的RNA是用于做什么的？
如果就是做PCR的，在设计引物的时候
可能跨内含子，这样即使有DNA污染也没关系的
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17楼2011-09-20 13:37:43
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DXY1

新虫 (初入文坛)
用TRIZOL提看不见DNA条带，但也许会有少许的DNA或者蛋白质会混在里面，如果想将RNA的质量再提高的话，可以再用个纯化试剂盒进行纯化
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18楼2011-09-20 13:37:43
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坏坏zjf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2011-09-19 08:56:33
看你后续的实验目的，有些实验是不用取出DNA的，用DNA酶处理有可能把RNA也降解掉了。

我现在也遇到了这样的问题，请问，我后面要做RT-PCR，而且我引物设计是跨了内含子的，这样的话，对荧光定量有没有影响啊？非常感谢哦！
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19楼2014-09-15 09:41:49
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