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小凡578

木虫 (小有名气)

[求助] 求助:色谱柱堵了

各位朋友,有没有遇到色谱柱堵了的问题,用什么溶剂冲比较好?还有就是,经常使用带有离子对的流动相,怎么冲才能冲的比较干净?
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liu-yu

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西湖醉鱼(金币+1): 欢迎常来 2011-08-16 20:09:10
小凡578(金币+5): 谢谢,用10%乙腈本来冲的好好的,突然柱压就上去了,直接就超3000了,都不明白怎么会堵,所有进系统的溶剂都是滤过的。。。 2011-08-16 20:13:23
先查找原因,根据原因采取补救方式。1.用甲醇走柱子。2、你可以反冲一下试一试,如果能通就多冲一阵子,效果好就继续,直到清洗通;3、拆开色谱柱进样口的一端,换一个筛板;4、如果不是筛板的问题,找一些类似的色谱填料,把柱头的色谱填料换一下,但色谱柱性能损失非常大,接近于半报废了,死马当活马医吧;5.取下,用溶剂在超声波中洗洗,也许能行;
我们一定行!加油!
2楼2011-08-16 19:22:45
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397489559

木虫 (正式写手)

个人感觉超声很不可取,容易造成塌陷,我们办公室的一位老师的柱子,就是超声后彻底报废的。我们这边药检所里的老师们采取一种很极端的方法,反向冲,自己没试过。还得看你是什么原因造成的?生物样品,盐缓冲液还是其他。
离子对的东西,冲洗时间要长(水的比例大一点,80%左右吧),1ml的流速至少需要1小时左右。再就是现在的色谱柱做的都比较好,即使用纯水冲的话,也能耐受,但不推荐。
终于苦尽甘来
3楼2011-08-16 19:47:27
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jiny

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

小凡578(金币+5): 2011-08-22 19:12:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by 397489559 at 2011-08-16 19:47:27:
个人感觉超声很不可取,容易造成塌陷,我们办公室的一位老师的柱子,就是超声后彻底报废的。我们这边药检所里的老师们采取一种很极端的方法,反向冲,自己没试过。还得看你是什么原因造成的?生物样品,盐缓冲液还 ...

平时做完样用20倍的柱体积用90%水冲洗
4楼2011-08-17 22:56:41
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nhuzwj

金虫 (小有名气)

一般都是筛板堵,换一个就好了
5楼2011-08-18 08:08:04
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恋上起司猫

铁虫 (小有名气)

纯水-5%甲醇水-纯甲醇 这个顺序冲洗看一下,一定先用纯水冲洗1h
(使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然 后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆 外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。)
如果柱子使用时间长,已堵塞久,可用5%硝酸冲洗
6楼2011-12-12 11:02:36
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