24小时热门版块排行榜    

查看: 1858  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

空蓝Y劫

新虫 (小有名气)

[求助] westen blot 染色

最近做western blot 实验结果总是不理想,不出条带。开始时以为是转膜的问题,但染色后的膜在放置一晚上后,染色液蒸发掉了,这个时候在膜上竟然出现条带了!!,

这是怎么个情况呢??

染色液不知道是什么东西,见上面有 amresco 字样,

膜的话上有Hybond字样,使用前100%甲醇浸泡10s.
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-08-12 22:56:59
空蓝Y劫(金币+1): 额,三明治没写全,从下到上,依次是:黑板,海绵,滤纸,胶,膜,滤纸,海绵,白板。这个顺序没问题吧?黑板靠黑面放 2011-08-15 08:51:30
当然有这种情况。但一般来说200ma一小时对湿法也不算太大。不知道你的转膜装置是多大,我以前一直350ma1小时的。pvdf膜极性较强能吸附的蛋白多,很难全部跑到膜外。你的预染marker在哪里?那个是最直接的证据,转不上应该还在胶里,转过头了既不在胶上也不在膜上。还有你上面写的那个三明治,怎么没有看见胶。胶和膜贴合是否紧密没有气泡?
How about the future?
8楼2011-08-12 22:22:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-12 09:43:49
典型的PVDF膜,这种膜的结合能力较强,杂交背景一般比较深。你用的半干法还是湿法转膜?有没使用预染marker?后者就是阳性对照,一般会标示为prestained
How about the future?
2楼2011-08-12 09:34:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空蓝Y劫

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by w2boluo at 2011-08-12 09:34:20:
典型的PVDF膜,这种膜的结合能力较强,杂交背景一般比较深。你用的半干法还是湿法转膜?有没使用预染marker?后者就是阳性对照,一般会标示为prestained

用的是预染Marker啊,就是跑完SDS-PAGE后不用染色直接就能看到的Marker吧,
3楼2011-08-12 10:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空蓝Y劫

新虫 (小有名气)

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励新虫交流~祝顺利! 2011-08-14 09:38:22
应该是湿转,因为用到那个三明治,一黑板,一海绵,一滤纸,一PVDF膜,然后滤纸,海绵,板,这样的,
4楼2011-08-12 10:52:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Qj98d49dHFb9 2026-08-25 4/200 2026-08-26 03:08 by cNXvBfCpiZOM
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 7K1CJE38xLG4 2026-08-25 4/200 2026-08-26 02:04 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +18 angus9576 2026-08-25 22/1100 2026-08-26 00:41 by merchancy
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +20 羊腰板 2026-08-21 23/1150 2026-08-25 16:34 by zsna
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +7 炎黄贵胄 2026-08-22 8/400 2026-08-25 08:48 by ZJTJZ
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
信息提示
请填处理意见