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friya0910

新虫 (正式写手)

[求助] 连接体系的确定

这是我酶切载体和目的基因以后切胶回收的电泳图,左边为载体,右边为目的片段,上样量均为2微升,有没有高手帮我看看我的连接体系中载体和目的片段怎么定量啊?我用的是宝生物的T4连接酶,25微升的体系加1微升的酶和2.5微升的buffer。还有一个问题是连接之后的连接液可以直接做转化么?我看说明书上说还要加醋酸钠,无水乙醇沉淀等!
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傻子

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
friya0910(金币+1): 2011-08-12 09:12:07
西瓜(金币+2): goood 2011-08-12 17:55:53
这个电泳图有4个条带,并且只有一个泳道是单条带的,所有不确定你的目的片段和载体在哪里。
具体的浓度可以依据marker条带来定量,具体参见说明书,会给出每个大小条带对应的DNA量。知道浓度后,再换算载体和目的片段的摩尔浓度。
1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能,国家免检优质产品。
7楼2011-08-12 08:00:52
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